T_NAIA 0377-2025 牛奶和奶粉中9种青霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法.docxVIP

ICS67.100

CCSC144

T/NAIA

团体标准

T/NAIA0377—2025

牛奶和奶粉中9种青霉素残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

Determinationofninepenicillinresiduesinmilkandmilk

powderbyHPLC-MS/MS

2025-03-17发布2025-03-31实施

宁夏化学分析测试协会发布

T/NAIA0377—2025

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、北方民族大学、宁夏计量质量检验检测研究院、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：朱燕燕、马桂娟、卜春苗、姚博伟、张学玲、刘竞择、高永梅、孙少忆、吕毅、吴明、张小飞。

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牛奶和奶粉中9种青霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了牛奶和奶粉中9种青霉素（阿莫西林、氨苄西林、哌拉西林、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、萘夫西林、双氯西林）的液相色谱-串联质谱检测方法。

本文件适用于牛奶和奶粉中9种青霉素的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样用70%的乙腈水溶液超声提取，经分散固相萃取法净化后，通过反相色谱柱分离，供液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈：色谱纯。

5.1.2甲酸：优级纯。

5.1.3十八烷基（C18）粉末：粒径50μm。

5.1.4N-丙基乙二胺（PSA）粉末：粒径50μm。

5.1.5无水硫酸镁：优级纯。

5.1.60.2%甲酸水溶液：取2.0mL甲酸（5.1.2），用水定容到1000mL，混匀。

5.1.70.2%甲酸乙腈溶液：取2.0mL甲酸（5.1.2）用乙腈（5.1.1）定容到1000mL，混匀。

5.1.870%乙腈溶液：取700mL乙腈（5.1.1），用水定容到1000mL，混匀。

5.1.920%乙腈溶液：取200mL乙腈（5.1.1），用水定容到1000mL，混匀。

5.2标准品

9种青霉素标准品名称、化学分子式、CAS号和纯度见附录表A。

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5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备液（1.0mg/mL）：分别准确称取9种青霉素10.00mg，用水溶解并定容至10.0mL，避光冷冻贮存，有效期1个月。

5.3.2混合标准储备液：分别移取青霉素G和萘夫西林标准储备液适量，混合后用水逐级稀释得到

1.0μg/mL的混合标准储备液I;将其余7种青霉素用同样的方式进行稀释，得到1.0μg/mL的混合标准储备溶液II，避光冷冻贮存，有效期7天。

5.3.3标准工作溶液：分别准确吸取不同体积混合标准储备液I和II，用空白样品基质定容至1.0mL，配制成青霉素G和萘夫西林的浓度分别为0.1、0.2、0.4、1.0、2.0、5.0、10.0ng/mL，其余7种青霉素的浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0ng/mL的系列标准工作溶液，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。

6.2天平：感量0.01mg和0.01g。

6.3涡旋混合器。

6.4高速离心机：转速不低于8000r/min。

6.5超声波清洗器。

6.6氮吹仪。

6.7有机微孔滤膜，孔径0.22μm，或相当者。

7分析步骤

7.1制备与保存

取适量牛奶，混合均匀，于-18℃避光保存。

取适量奶粉，混合均匀，常温避光保存。

7.2提取与净化

7.2.1提取

称取牛奶试样5g或奶粉试样1g（精确至0.01g）于50mL