DB1301T 361-2020 蜜蜂微孢子虫病综合防治技术规程.docxVIP

ICS

CCS

65.020.30B41

1301

石家庄市地方标准

DB1301/T361—2020

蜜蜂微孢子虫病防治技术规程

2020-12-10发布2020-12-31实施

石家庄市市场监督管理局发布

DB1301/T361—2020

I

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4诊断与鉴定 1

4.1诊断流程 1

4.2症状 1

4.3实验室鉴定 2

4.4取样 4

5防控 4

5.1蜂场场址选择 4

5.2饲养管理 4

5.3监测 4

5.4防治 5

附录A（规范性）PCR反应体系及引物序列 6

A.1PCR反应体系 6

A.2引物序列 6

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II

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由石家庄市农业农村局提出。

本文件起草单位：石家庄市动物疫病预防控制中心、中国农业科学院蜜蜂研究所、石家庄赞皇县蕊源蜂业有限公司。

本文件主要起草人：王强、王荣申、陈海军、武瑞栓、王岳森、郭伟婷、张伟涛、王岳峰、许亚改、吕洁、周文茂、曹莉、孙海红、张一伟、王聪敏、席立朋、翟可、韩扶民、韩宁凯、邢伟山、杨双学。

DB1301/T361—2020

1

蜜蜂微孢子虫病防治技术规程

1范围

本文件规定了蜜蜂微孢子虫病诊断与鉴定、防控的方法。

本文件适用于蜜蜂微孢子虫病症状、形态及分子生物学诊断和综合防治。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T19168蜜蜂病虫害综合防治规范

SN/T1683蜜蜂微孢子虫病诊断方法

OIE陆生动物卫生法典

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

蜜蜂微孢子虫

是一种侵染成年蜜蜂中肠上皮细胞引起蜜蜂发病的致病性真菌，包括蜜蜂微孢子虫和东方蜜蜂微孢子2个种。

3.2

消毒

指为杀灭包括蜜蜂疫病病原体或寄生虫而采取的一种措施，适用于可能曾被直接或间接污染的场所、工具及各种物体

[来源：OIE陆生动物卫生法典，总论之术语表，有修改]

3.3

监测

指系统而持续地收集、整理和分析与蜜蜂微孢子虫病有关的信息，并及时向相关人士传递信息以便采取相应行动的措施。

[来源：OIE陆生动物卫生法典，总论之术语表，有修改]

4诊断与鉴定

4,1诊断流程

当观察到蜂群出现典型症状时应遵循先通过个体症状观察初步确诊，再取样后通过显微镜鉴定即可确诊。如需对没有明显症状的蜂群进行早期诊断或例行蜂场的病害监控则可采用PCR鉴定的方法。

4.2症状

DB1301/T361—2020

2

4.2.1蜂群症状

急性重症感染

当蜂群感染处于后期重症阶段时有如下症状：

a)蜂群粪便：蜂箱外壁或周围地面会出现大量棕色约0.5cm长的细长条状粪便痕迹；

b)蜂群表现：在蜂巢入口处及蜂场地面，会见到患病爬行的和死去的蜜蜂。

轻度感染

除了部分成年蜜蜂在蜂箱外爬行外，没有其他异常表现。

4.2.2蜜蜂个体症状

蜜蜂个体感染病原后可通过如下症状进行初步判断。

a)病蜂活动状况：患病蜜蜂表现出行动迟滞，腹部膨大，飞翔无力等症状。

b)用镊子从具有典型症状的蜜蜂腹部末端夹出中肠及后肠仔细观察。健康蜜蜂中肠正常呈棕色，环纹明显，并且具有弹性和光泽。如观察到蜜蜂中肠膨大，呈乳白色，环纹不清，失去弹性和光泽，即可初步确定为蜜蜂微孢子虫病。

4.3实验室鉴定

4.3.1显微镜鉴定

样品处理

将采集的蜜蜂样本，分离腹部置于研钵中，加入5mL～10mL蒸馏水研磨。取研磨的组织涂片，在明场或相差光学显微镜下以400倍～600倍进行检查。

鉴定

.1初诊

如在视野中见到长约5μm～7μm，宽约3μm～4μm，椭圆形的孢子，边界折光明显，则可初步确诊。

.2鉴别

按SN/T1683相关方法与酵母、真菌孢子、脂肪体或马氏管变形虫囊包进行鉴别。

4.3.2PCR