细胞工程植物细胞培养与次生产物生产.pptVIP

培养液的黏度变化是由细胞密度和细胞状态变化引起的；烟草培养液的表观黏度主要是由培养细胞密度引起的。当细胞密度低于7g/L时，培养液的黏度基本保持不变，当细胞密度高于此值时，培养液的黏度就增加；长春花细胞培养，当细胞密度在10g/L时，培养液属于假塑性流体，此时，培养液的黏度依赖于细胞年龄、形态和细胞团的大小。在相同物质浓度下，大细胞团的营养液表观黏度明显大于小细胞团培养液的表观黏度。第62页，共82页，星期日，2025年，2月5日体积氧传递系数(KLa，单位时间单位体积氧量)：如，在4L的气升式反应器中进行长春花细胞培养时，KLa在20h-1左右时，细胞生长与次生产物合成均维持在良好状态；如，在15L的通风式反应器中培养的烟草细胞，KLa值在5～10h-1的范围内随着KLa的增加，生物量和代谢产物也呈线性增加；溶氧浓度：在不同氧浓度下对毛地黄细胞进行培养，结果显示，当培养基氧浓度从10%饱和度上升至30%时，细胞生长速率从0.15d-1上升至0.20d-1，如果溶氧浓度继续上升至40%饱和度时，细胞生长速率反而下降至0.17d-1。第63页，共82页，星期日，2025年，2月5日植物细胞能非光合地利用CO2，如在通气调节过程中，混入2%～4%的CO2即能消除高通气速率对长春花细胞生长和产生代谢产物的不利影响。第64页，共82页，星期日，2025年，2月5日植物细胞大规模培养中易产生大量的泡沫，且覆盖有蛋白质和粘多糖，细胞极易被包埋在其中从循环的培养液中带出来，形成非均相培养，从而影响培养系统的稳定性和生产率。第65页，共82页，星期日，2025年，2月5日化学消泡剂：----具有一定的表面张力和一定的亲水性，以使消泡剂对气/液界面的分散系数足够大，消泡作用迅速有效；----化学性质稳定，在水中的溶解度小，不与次生产物起任何化学反应对植物细胞无毒害；----不影响气体在营养液中的传递和溶解；----来源方便，价格便宜；----常用的化学消泡剂包括天然油脂质、高级醇类、聚醚类和硅酮类，实际应用中必须根据所培养的植物种类、次生产物特性等具体选择。第66页，共82页，星期日，2025年，2月5日机械消泡是靠机械装置实现的。优点是勿需在培养液中加入其它物质，从而减少了由于消泡剂所引起的污染和对后续分离工艺的影响。但效果不如化学消泡迅速彻底同时也会增加培养装置的复杂性。第67页，共82页，星期日，2025年，2月5日四培养细胞的次生代谢及产物积累植物次生代谢及其产物类型提高细胞次生产物产量的途径培养下的植物细胞次生产物积累特性第68页，共82页，星期日，2025年，2月5日合成生命活动必需物质的代谢过程称为初生代谢(primarymetabolism)，这是一类普遍存在于生物中的代谢类型，与生物生存有关的、涉及到能量产生和消耗的代谢类型。所生成的物质有糖类、脂类、核酸和蛋白质等，这些产物称为初生代谢产物(primarymetabolites)。（一）植物次生代谢及其产物类型利用某些初生代谢产物产生的一类与植物生命活动无直接关系的小分子化合物如甙类、生物碱类、萜类、内酯类、酚类化合物等，它们称为次生代谢产物(secondarymetabolites)把这个代谢过程称次生代谢(secondarymetabolism)。第69页，共82页，星期日，2025年，2月5日1、酚类化合物—包括黄酮类、醌类和简单酚类许多黄酮类化合物是治疗心血管疾病和高血压的药物成分，异黄酮类往往是植物抗毒素；醌类化合物按环系统不同可以分为苯醌、萘醌及蒽醌。醌是植物呈现颜色的主要物质基础，有些醌类化合物具有抗菌、抗癌作用；简单酚类广泛分布于植物的叶片及其他组织中，对植物发育有一定的调节作用，有些酚类化合物是植物抗毒素的重要成分第70页，共82页，星期日，2025年，2月5日2、萜类化合物萜类化合物是由异戊二烯单元组成的化合物，在植物体内通过异戊二烯途径合成，广泛分布于各类植物中，已知萜类化合物已超过2万种；根据异戊二烯单元数目及其结构的不同可分为单萜、倍半萜、二萜、二倍半萜、三萜以及甾类化合物；单萜和倍半萜是植物挥发油和香料的主要成分。有的具有重要药用价值如目前抗疟疾最佳药物青蒿素是一种倍半萜，抗癌药物紫杉醇则是二萜生物碱。植物体内三萜皂甙元和甾体皂甙元分别与糖类结合可形成三萜皂甙和甾体皂甙，如人参皂甙和薯蓣皂甙等。第71页，共82页，星期日，2025年，2月5日3、含氮化合物含氮化合物主要包括生物碱、胺类、非蛋白质氨基酸和生氰苷。其中生物碱是一类含氮的碱性天然产物，已知的生物碱已达5