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ICS65.020.20
B05
DB1301
石家庄市农业地方标准
DB1301/T328—2019
甘薯茎尖组织培养及脱毒试管苗
快繁技术规程
2019-11-18发布2020-01-18实施
石家庄市市场监督管理局发布
DB1301/T328—2019
前言
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。
本标准由石家庄市农业农村局提出并归口。
本标准起草单位:石家庄卓农农业科技中心、石家庄市农业技术推广中心、河北嘉丰种业有限公司。
本标准主要起草人:谷增辉、孙志军、张辉、高倩、宋小颖、许刚、刘鑫翠、王颖、赵海龙、黄剑
冲、刘娜、马亚、赵蒙蒙。
I
DB1301/T328—2019
甘薯茎尖组织培养及脱毒试管苗
快繁技术规程
1范围
本标准规定了甘薯脱毒试管苗、茎尖组织培养、甘薯脱毒试管苗组培室快繁、甘薯脱毒试管苗保护
地快繁的内容和技术要求。
本标准适用于石家庄地区甘薯茎尖组织培养及脱毒试管苗的快繁。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T28142—2011吡虫啉可湿性粉剂
HG/T3290—2016多菌灵可湿性粉剂
HG/T5120—2016啶虫脒微乳剂
NY/T402—2016脱毒甘薯种薯(苗)病毒检测技术规程
NY/T1200—2006甘薯脱毒种薯
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
脱毒试管苗
由茎尖分生组织培养获得的未受甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)、甘薯潜隐病毒(SPLV)、甘薯G病毒
(SPVG)、甘薯褪绿斑病毒(SPCFV)、甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)和甘薯双生病毒(Sweepoviruses)
侵染的试管苗。
[改写NY/T402—2016,定义2.1]
4甘薯茎尖脱毒技术
4.1薯块热处理
田间选取具有该品种典型特征植株结构的薯块,用恒温水浴锅将水加热到57℃,把薯块置于温水中
浸泡3min,然后将温度降至(51±1)℃温水中浸泡30min,在浸泡过程中不断翻动薯块,使其受热均
匀。
4.2外植体的获取
1
DB1301/T328—2019
薯块热处理后,再用50%多菌灵可湿性粉剂(符合HG/T3290—2016相关要求)800倍药液浸泡消毒
15min,在25℃~30℃无菌条件下盆栽催芽。当薯苗长至6片~8片叶时,切下顶部约2cm~3cm长
的芽段。
4.3外植体消毒
消毒前芽段先用自来水冲洗10min,在无菌条件下,用75%酒精消毒30s,再将芽段置入0.1%氯化
汞溶液灭菌5min~10min,无菌水冲洗3~5遍,用灭过菌的滤纸吸干水分,备用。
4.4茎尖的剥离和培养
4.4.1操作前准备
在芽段消毒前,所有器具用75%酒精均匀擦拭消毒,打开超净操作台鼓风机开启紫外灯20min,工
作人员用肥皂仔细清洗手臂,更换已消毒的工作服、工作鞋、工作帽,用75%酒精严格擦拭双手或戴无
菌手套,关闭紫外灯20min后进行操作。
4.
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