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3.tRNA的功能????转录过程是信息从一种核酸分子(DNA)转移至另一种结构上极为相似的核酸分子(RNA)的过程,信息转移靠的是碱基配对。翻译阶段遗传信息从mRNA分子转移到结构极不相同的蛋白质分子,信息是以能被翻译成单个氨基酸的三联子密码形式存在的,在这里起作用的是解码机制。第30页,共85页,星期日,2025年,2月5日4.tRNA的种类(1)起始tRNA和延伸tRNA
?????能特异地识别mRNA模板上起始密码子的tRNA叫起始tRNA,其他tRNA统称为延伸tRNA。原核生物起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸(fMet),真核生物起始tRNA携带甲硫氨酸(Met)。(2)同工tRNA
????代表同一种氨基酸的tRNA称为同工tRNA,同工tRNA既要有不同的反密码子以识别该氨基酸的各种同义密码,又要有某种结构上的共同性,能被AA-tRNA合成酶识别。第31页,共85页,星期日,2025年,2月5日(3)校正tRNA
???校正tRNA分为无义突变及错义突变校正。
???在蛋白质的结构基因中,一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子(UAG、UGA、UAA),使蛋白质合成提前终止,合成无功能的或无意义的多肽,这种突变就称为无义突变。第32页,共85页,星期日,2025年,2月5日五.AA-tRNA合成酶AA-tRNA合成酶是一类催化氨基酸与tRNA结合的特异性酶,其反应式如下:它实际上包括两步反应:第一步是氨基酸活化生成酶-氨基酰腺苷酸复合物。
AA+ATP+酶(E)→E-AA-AMP+PPi
第二步是氨酰基转移到tRNA3’末端腺苷残基上,与其2’或3’-羟基结合。
E-AA-AMP+tRNA→AA-tRNA+E+AMP第33页,共85页,星期日,2025年,2月5日第34页,共85页,星期日,2025年,2月5日第35页,共85页,星期日,2025年,2月5日蛋白质合成的真实性主要决定于AA-tRNA合成酶是否能使氨基酸与对应的tRNA相结合。AA-tRNA合成酶既要能识别tRNA,又要能识别氨基酸,它对两者都具有高度的专一性。不同的tRNA有不同碱基组成和空间结构,容易被tRNA合成酶所识别,困难的是这些酶如何识别结构上非常相似的氨基酸。第36页,共85页,星期日,2025年,2月5日第37页,共85页,星期日,2025年,2月5日有两道关口:
Thefirstfilteristheinitialbindingoftheaminoacidtotheenzymeanditsactivationtoaminoacyl-AMP.?
Thesecondfilteristhebindingofincorrectaminoacyl-AMPproductstoaseparateactivesiteontheenzyme.第38页,共85页,星期日,2025年,2月5日六.核糖体核糖体像一个能沿mRNA模板移动的工厂,执行着蛋白质合成的功能。它是由几十种蛋白质和几种核糖体RNA(ribosomalRNA,rRNA)组成的亚细胞颗粒。一个细菌细胞内约有20000个核糖体,而真核细胞内可达106个,在未成熟的蟾蜍卵细胞内则高达1012。核糖体和它的辅助因子为蛋白质合成提供了必要条件。第39页,共85页,星期日,2025年,2月5日第40页,共85页,星期日,2025年,2月5日1.核糖体的组成???原核生物核糖体由约2/3的RNA及1/3的蛋白质组成。真核生物核糖体中RNA占3/5,蛋白质占2/5。核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒,可以解离为两个亚基,每个亚基都含有一个相对分子质量较大的rRNA和许多不同的蛋白质分子。???大肠杆菌核糖体小亚基由21种蛋白质组成,分别用S1……S21表示,大亚基由33种蛋白质组成,分别用L1……L33表示。真核生物细胞核糖体大亚基含有49种蛋白质,小亚基有33种蛋白质。?第41页,共85页,星期日,2025年,2月5日第42页,共85页,星期日,2025年,2月5日第43页,共85页,星期日,2025年,2月5日2、rRNA第44页,共85页,星期日,2025年,2月5日3.核糖体的功能????核糖体包括至少5个活性中心,即mRNA结合部位、结合或接受AA-tRNA部位(A位)、结合或接受肽基tRNA的部位、肽基转移部位(P位)及形成肽键的部位(转肽酶中心),此外还有负责肽链延伸的各种延伸因子的结合位点。小亚基上拥有mRNA结合位点,负责对序列特异的识别过程,如起始位
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