DB1307T 394-2022 母驴人工授精技术规程.docxVIP

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DB1307

张家口市地方标准

DB1307/T394—2022

母驴人工授精技术规程

2022-10-27发布2022-11-27实施

张家口市市场监督管理局发布

I

DB1307/T394—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由张家口市农业农村局提出并归口。

本文件起草单位：阳原县农业农村局、中国农业大学、张家口桑阳牧业有限公司、张家口市农产品质量安全监督检验中心。

本文件主要起草人：曾申明、庞洁、沈学梅、王海丽、韩海军、武开、白海宾、闫冬梅、肖江龙、贾建平、祁建平、李靖、李楠、王佳敏。

DB1307/T394—2022

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母驴人工授精技术规程

1范围

本文件规定了母驴人工授精的发情鉴定、精液准备、输精、妊娠鉴定、数据记录和废弃物无害化处理操作技术要求。

本文件适用于张家口地区内母驴的人工授精操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T39171—2020废塑料回收技术规范

3术语与定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

hCG

指人绒毛膜促性腺激素。

3.2

GnRH

指促性腺激素释放激素。

3.3

CASA

指计算机辅助精液分析系统。

4发情鉴定

4.1试情法

挑选体质健壮、性欲旺盛的种公驴进行试情。牵拉种公驴在母驴圈舍外部通道走动，或者拴系在母驴圈内的柱桩上。处于发情期的母驴表现出愿意接近公驴，并有弓腰举尾、阴唇闪合、频繁排尿、后肢张开、两耳向颈部收拢、口部频繁开合等行为；未发情母驴则躲避公驴，甚至在公驴靠近时，有蹴踢和啃咬等抗拒行为。

4.2B超直肠发情鉴定

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4.2.1所需设备及试剂

B型超声波诊断仪、一次性长臂手套、润滑剂、促排卵药物、注射器。

4.2.2母驴的发情鉴定

将待检母驴用保定栏固定后，检查者在操作前修剪并磨平指甲，清洗消毒手臂，戴上一次性长臂手套并抹上润滑剂，在母驴后方将手握成锥形缓慢插入肛门。若直肠内有粪便可用手清除，待直肠内部干净且直肠壁舒缓时，将手臂深入触摸卵巢。然后，将B型超声波诊断仪探头握在手心，平行并紧贴直肠壁下缘，依次检查母驴子宫体、子宫角和卵巢卵泡发育状态。卵泡发育形态参照附录B.1。母驴发情阶段一般分为以下四个阶段：

a)间情期：卵泡上有多个小卵泡、直径为10mm～20mm；子宫角和子宫体回声均匀，没有液体存留；此阶段母驴阴道干涩，不接受爬跨，抗拒直肠检查；

b)发情前期：卵巢上出现优势卵泡，体积增加较快，卵泡内充满液体，卵泡直径一般为20mm～30mm；子宫角出现水肿，阴道有少量稀薄粘液流出；部分母驴出现发情行为，表现为接近公驴，少部分出现口部反复开合、两耳向颈部收拢；

c)发情期：优势卵泡快速生长，直径达到30mm以上，此时母驴出现明显的发情行为，主动接近公驴、接受爬跨、频繁排尿，口部反复开合、两耳向颈部收拢；子宫角水肿明显；

d)发情后期：卵泡破裂排卵，检查时可见明显黄体，母驴性情逐渐安静；子宫角水肿消失。

4.2.3发情母驴的处理

诊断结束后，准确记录母驴的卵泡、子宫和黄体状态，在母驴后背标记卵泡发育情况，挑选出优势卵泡直径在30mm以上的母驴，注射l.0mL的GnRH类似物或2000IUhCG，优势卵泡直径在≥35mm的母驴在当天下午输精，而优势卵泡直径在30mm～35mm的母驴在第二天下午进行输精。

5精液准备

5.1所需设备及试剂

一次性长臂手套、显微镜、CASA系统、量筒、温度计、恒温水浴锅、假阴道、集精杯、稀释液、润滑剂、高压蒸汽灭菌锅、精液分装瓶、烧杯、毛巾、温水、消毒液、酒精、纱布、20mL注射器、载玻片、盖玻片。

5.2采精前准备

5.2.1稀释液的准备

在发情鉴定当天，按照发情母驴的数量准备稀释液，力求新鲜，稀释液配好后要进行灭菌，然后在4℃保存。在采精前半小时，将稀释液置于37℃水浴锅中预热待用。

5.2.2采精器具的准备

采精所用的器具及相关用品，提前清洗消毒，安装假阴道时，将内胎两头翻转套在外壳的两端，并用橡胶圈加以固定，然后用70%酒精对内部进行消毒，放入35℃恒温箱中备用。

5.2