DB22_T396.5-2017_保健用品毒理学评价程序与检验方法第5部分：皮肤变态反应试验_吉林省.docxVIP

ICS

11.020

DB22

C05

吉林省地方标准

DB22/T396.5—2017

代替

DB22/T396-2014

保健用品毒理学评价程序与检验方法

第5部分：皮肤变态反应试验

Toxicologicalevaluationproceduresandtestmethodsforhealthcareproducts

Part5:Skinallergytest

吉林省质量技术监督局

发布

1

DB22/T396.5—2017

前言

DB22/T396《保健用品毒理学评价程序与检验方法》拟分为如下部分：

——第1部分：评价程序；

——第2部分：急性经皮毒性试验；

——第3部分：长期经皮毒性试验；

——第4部分：皮肤刺激性试验；

——第5部分：皮肤变态反应试验；

——第6部分：细菌回复突变试验；

——第7部分：啮齿动物微核试验；

——第8部分：小鼠精子畸形试验；

——第9部分：哺乳动物培养细胞染色体畸变试验；

——第10部分：致畸试验；

——第11部分：致癌试验；

——第12部分：人体皮肤斑贴试验。

本部分为DB22/T396-2071的第5部分。

本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本部分代替DB22/T396-2014《保健用品毒理学评价程序与检验方法》，与DB22/T396-2014相比，

结构做了较大调整。除编辑性修改外，主要技术内容变化如下：

——增加了警示；

本部分由吉林省卫生与计划生育委员会提出并归口。

本部分起草单位：吉林省疾病预防控制中心。

本部分主要起草人：孟令仪、宋昕恬、张晶莹、孙兰、吴晓刚、隋自洁、高峰。

本部分所代替标准的历次版本发布情况为：

——DB22/T396-2004；

——DB22/T396-2014。

DB22/T396.5—2017

保健用品毒理学评价程序与检验方法第5部分：皮肤变态反应试验

警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问

题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。

1范围

本标准规定了保健用品毒理学皮肤变态反应试验评价程序。

本标准适用于保健用品毒理学皮肤变态反应试验检验方法。

2保健用品毒理学皮肤变态反应试验检验方法

2.1材料

2.1.1动物

白色豚鼠30只，体重250g～300g。于给受试物前24h，将豚鼠背部毛脱掉，去毛范围每侧约4cm～

2

6cm,体表面积估算值计算方法见附录A。

2

如为固体粉末，需用适量的赋形剂混匀，以保证受试物与皮肤的良好接触。如受试物是液体或半固

体的膏剂，可直接用于试验。

电子天平：精确到0.1g。

2.3试验方法

取受试物0.2mL(或g)，涂在动物左侧背部脱毛区皮肤上，以二层纱布和一层硫酸纸覆盖，再以无

刺激胶布封闭固定6h，第7d和第14d，以同样方法重复一次。

于末次给受试物致敏后14d～28d，将受试物约0.2mL（或g）涂于豚鼠背部右侧脱毛区，然后以

二层纱布和一层硫酸纸覆盖，再以无刺激胶布封闭固定6h。激发接触后24h、48h观察皮肤反应情况。

按表1皮肤变态反应评分标准评分。

DB22/T396.5—2017

阴性对照组操作和观察方法同受试物组，在诱导接触时仅涂赋形剂，在激发接触时涂以受试物。对

照组动物必须和受试物动物为同一批。在实验室开展变态反应试验初期，或使用新的种属或品系时，需

同时设阳性对照组，给予适当浓度的2,4-二硝基氯代苯（DNCB）。

2.4结果评价

2.4.1当受试物组动物出现皮肤反应积分≥2时，判为该动物出现皮肤变态反应阳性，按表2判断受

试物的致敏率。致敏率的计算是：将出现皮肤变态反应阳性（不论程度轻重）的动物例数除以受试动物

总数。

2.4.2如激发接触所得结果仍不能确定，应于第一次激发后一周，给予第二次激发，对照组作同步处

理。

表1皮肤变态反应的评分标准

皮肤反应

积分

红斑和焦痂形成

无红斑

0

1

2

3

4

轻度红斑（勉强可见）

明显红斑（散在或小块红斑）

中度～重度红斑

严重红斑（紫红色）至轻微焦痂形成

水肿形成

轻微水肿（勉强可见）

中度水肿（皮肤隆起，轮廓清楚）

重度水肿（皮肤隆起约1mm或超过1mm）

最高总分值

表2变态反应致敏强度

2

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AA

附录A

（规范性附录）

实验动物体表面积估算方法

A.1兔

2

s=k×m

.....................................(A.1)

3

式中：

s——体表面积，cm

2

；

k