DB43T 889-2014 饲料中巴氯芬的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS

ICS65.120B46

湖南省地方标准

DB43/T889—2014

饲料中巴氯芬的测定

高效液相色谱法

DeterminationofBaclofeninfeeds

Highperformanceliquidchromatographicmethod

2014-06-10发布2014-08-10实施

湖南省质量技术监督局发布

I

DB43/T889—2014

目次

前言 Ⅱ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3原理 1

4试剂与材料 1

5仪器与设备 2

6采样与试样的制备 2

7分析步骤 2

8结果计算 3

9灵敏度、准确度、精密度 3

附录A（资料性附录）饲料中巴氯芬高效液相色谱图 4

DB43/T889—2014

II

前言

本标准按GB/T1.1-2009的规则编制。

本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。

本标准起草单位：湖南省兽药饲料监察所。

本标准主要起草人：易建希、武深树、陈福华、胡保国、肖安东、隆雪明、欧阳龙、魏群、何红艳、邓昉、周宇骏。

DB43/T889—2014

1

饲料中巴氯芬的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中巴氯芬高效液相色谱的测定方法。

本标准适用于我省配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料中巴氯芬的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适应于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3原理

采用稀酸溶液提取试样中含有的巴氯芬，混合型阳离子固相萃取柱净化，氨化甲醇溶液洗脱，高效液相色谱法紫外测定，外标法定量。

4试剂与材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682规定的一级水。

4.1甲醇色谱纯。

4.2乙腈色谱纯。

4.3磷酸色谱纯。

4.4偏磷酸。

4.5氨水。

4.6偏磷酸溶液：称取14.29g偏磷酸用水溶解，并稀释至1L。

4.7流动相：1mL磷酸用水稀释至1L，并按89：11的比例和乙睛混合，用前超声脱气5min。

4.8氨水-甲醇溶液：将4mL氨水与96mL甲醇混合均匀，即得。

4.9标准品：巴氯芬，纯度≥98%。

4.10标准储备液的配制：精确称取巴氯芬标准品10mg（精确到0.00001g），加适量甲醇超声溶解并用甲醇定容于50mL容量瓶中。配制成浓度为0.2mg/mL的标准储备液。4℃以下避光可保存3个月。

4.11标准工作曲线的配制：准确移取适量巴氯芬标准储备液，用流动相配成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.50μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL、5.00μg/mL的标准工作曲线，现配现用。

4.12微孔滤膜：0.22μm，有机膜。

4.13混合型阳离子固相萃取柱：MCX（60mg/3mL），或相当者。

DB43/T889—2014

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5仪器与设备

5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。

5.2分析天平：感量0.00001g和0.001g。

5.3固相萃取装置。

5.4旋涡混匀器。

5.5离心机：转速≥8000r/min。

5.6超声波清洗机。

5.7恒温振荡器。

5.8氮吹仪。

6采样与试样的制备

6.1采样按GB/T14699.1的规定执行。

6.2试样制备按GB/T20195的规定执行。

7分析步骤

7.1提取

称取试样2g（精确到0.001g）,置于100mL具塞锥形瓶中,准确加入50.00mL偏磷酸溶液，室温下超声提取10min，振荡摇床120r/min，振荡20min。静置分层，取上清液30mL,8000r/min离心5min，取上清液供固相萃取净化。

7.2净化

将固相萃取柱依次用5mL甲醇、5mL水活化，准确移取5.00mL上述提取液过柱，分别用5mL水、5mL甲醇淋洗固相萃取柱，真空抽干。5mL氨水-甲醇溶液洗脱，收集全部洗脱液。整个固相萃取过程流速控