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从江香猪生殖细胞体外培养体系构建及鉴定技术

目录

从江香猪生殖细胞体外培养体系构建及鉴定技术（1）．．．．．．．．．．．．4

一、内容概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1从江香猪生殖生物学特点．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2生殖细胞体外培养的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

二、从江香猪生殖细胞获取与分离技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1样品来源及准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1.1组织取材部位．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.1.2样品处理与保存．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2生殖细胞的分离方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

2.2.1酶消化法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.2.2密度梯度离心法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

三、生殖细胞体外培养体系的构建与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.1培养环境准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.1.1培养基的选择与配置．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

3.1.2培养器具及处理方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

3.2细胞接种与培养过程管理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

3.2.1细胞接种密度与时机．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

3.2.2培养条件及监测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

四、生殖细胞的鉴定技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

4.1形态学鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

4.2分子生物学鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

4.2.1基因检测与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

4.2.2蛋白质表达分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

五、从江香猪生殖细胞体外培养的应用前景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

从江香猪生殖细胞体外培养体系构建及鉴定技术（2）．．．．．．．．．．．32

一、内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

（一）研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

（二）研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

（三）研究方法与技术路线．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36

（一）实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

从江香猪样本采集．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

细胞分离与培养基制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

实验仪器与设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

（二）实验步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

细胞分离与培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

细胞传代与增殖．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48

体外受精与胚胎培养．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．