动物细胞培养和核移植ppt.pptxVIP

1、植物细胞工程常用的技术手段有哪些？2、原理？3、关键词？4、植物细胞工程的实际应用？植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术细胞的全能性；细胞膜的流动性和细胞的全能性细胞的全能性、离体、脱分化、愈伤组织、再分化、酶解法、物理法（电激、振动、离心）、化学法聚乙二醇（PEG）、

植物繁殖的新途径人工种子微型繁殖（6）细胞产物的工厂化生产作物脱毒作物新品种的培育突变体的利用单倍体育种植物细胞工程的实际应用

专题2.2动物细胞工程

单克隆抗体制备2动物细胞工程的基础4动物细胞融合1细胞核移植3动物细胞工程技术5动物细胞培养

动物细胞培养和核移植技术

动物细胞培养

（三）过程幼龄动物剪碎组织原代培养取动物器官和组织细胞悬浮液传代培养胰蛋白酶处理单个细胞胰蛋白酶处理单个细胞细胞贴壁细胞的接触抑制分瓶

动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液（分解细胞间的蛋白）原代培养胰蛋白酶或胶原蛋白酶剪碎细胞株细胞系动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质遗传物质未改变遗传物质已改变分瓶目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持正常二倍体核型。

细胞分裂增殖原理是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。（一）、概念

原代培养：人们通常将动物组织消化后的初次培养成为原代培养。通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代培养。1传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，通常被称为传代培养。2（将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。）3有关概念

分装后继续培养，10代以后原代培养：传代培养：分装之前，10代以前细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去细胞接触抑制，容易传代培养。原代培养与传代培养的区别

细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去细胞接触抑制，容易传代培养。321有关概念

细胞的接触抑制细胞贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。细胞系

为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖成块组织使细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。思考题：

3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。4、细胞膜的主要成份是什么？蛋白质和磷脂5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？能

6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？注意时间的控制不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近8、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？易于培养细胞贴壁，进行生长增殖

无菌、无毒的环境保证细胞顺利的生长增殖营养添加一定量的抗生素，定期更换培养液添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。（四）、动物细胞培养的条件

温度和pH培养室中控制,使之达到36.5±0.5℃,7.2~7.4培养所需气体O2和CO2（置于含95%空气和5%的CO2培养箱中）4、气体环境：O2和CO2作用？O2和是细胞代谢所必需的，（有氧呼吸）CO2的主要作用是维持培养瓶的pH胞的生理、药理、病理研究基因工程的受体细胞获得有重要价值的生物制品，如疫苗、干扰素用于检测有毒物质（五）、动物细胞培养技术的应用

前景展望资料一：

培养的动物细胞可以用于检测有毒物质。许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。现在动物细胞培养已经成为检测有毒物质的快速而灵敏的有效手段。01资料二：02

人工关节——软骨再生1.第一次手术:从病人关节软骨中未受力的部分，取出一片约为葡萄干大小的健康软骨组织。2.分离软骨细胞并经三星期的体外培养，使细胞数增加约10～20倍。3.第二次手术:清理软骨受损的部分，从下方骨头部位取出一片约与伤口大小相同的