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大豆KCS27基因克隆与表达模式研究

目录

大豆KCS27基因克隆与表达模式研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1.1大豆油料作物的经济价值．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

1.1.2脂肪酸合成相关基因的研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

1.2国内外研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

1.2.1大豆关键酶基因的克隆技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

1.2.2脂肪酸合成基因的表达调控机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

1.3研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

1.3.1研究目标．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

1.3.2研究内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

1.4技术路线与研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

2.1.1大豆品种．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

2.1.2主要试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

2.2.1基因组DNA提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.2.2KCS27基因的PCR扩增与克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.2.3KCS27基因的生物信息学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.2.4KCS27基因的表达模式分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

三、结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

3.1KCS27基因的克隆与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

3.1.1KCS27基因cDNA序列获取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

3.1.2KCS27基因编码蛋白特征分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

3.2KCS27基因的生物信息学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

3.2.1KCS27基因序列比对．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

3.2.2KCS27蛋白结构域预测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

3.2.3KCS27基因家族成员分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41

3.3KCS27基因的表达模式分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42

3.3.1KCS27基因在不同组织中的表达分布．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43

3.3.2KCS27基因在种子发育过程中的表达变化．．．．．．．．．．．．．．．．．45

3.3.3KCS27基因对不同生长调节剂的响应．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45

四、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46

4.1KCS27基因的生物功能推测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47

4.2KCS27基因的表达模式分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49

4.3KCS27基因与大豆油脂合成的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50

4.4本研究的创新点与不足．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．