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第1页,共29页,星期日,2025年,2月5日PrimarytranscriptRNA的剪接第2页,共29页,星期日,2025年,2月5日生物体内内含子的主要类型:
1.核基因mRNA的内含子
2,Ⅰ类内含子
3.Ⅱ类内含子第3页,共29页,星期日,2025年,2月5日剪接方式:1.剪接体完成的剪接2.自我剪接3.由蛋白酶完成的剪接
第4页,共29页,星期日,2025年,2月5日一、核基因mRNA的剪接1.参与RNA剪接的物质:snRNA(核内小分子RNA)snRNP(与snRNA结合的核蛋白)第5页,共29页,星期日,2025年,2月5日hnRNA和snRNA核内的初级mRNA称为杂化核RNA(hetero-nuclearRNA,hnRNA)snRNA(smallnuclearRNA)(并接体)核内的蛋白质核糖核酸蛋白体snRNA第6页,共29页,星期日,2025年,2月5日2、识别信号:GU……..AG100%保守分支点A第7页,共29页,星期日,2025年,2月5日3、过程——除去hnRNA中的内含子,将外显子连接并接体第8页,共29页,星期日,2025年,2月5日UACUACA-AGUGU4U5U6E1E2U1U2UACUACA-AGUGU6E1E2U1、U4、U5第9页,共29页,星期日,2025年,2月5日第10页,共29页,星期日,2025年,2月5日第11页,共29页,星期日,2025年,2月5日1.A的3’-OH攻击5’-剪接点,E1释放,形成套环结构2.E1的3’-OH攻击3’-剪接点,E1和E2连接,释放套环3.套环结构切断,降解核基因mRNA的剪接过程第12页,共29页,星期日,2025年,2月5日剪接体第13页,共29页,星期日,2025年,2月5日二、Ⅰ类内含子的自我剪接1、识别信号:5’-U3’-G第14页,共29页,星期日,2025年,2月5日I类内含子的剪接过程
----四膜虫rRNA为例1.G-OH攻击5’-剪接点释放5’端的外显子E1-OH,G-I-E22.E1的3’-OH攻击3’-剪接点,E1和E2连接,释放I3.线形I经多次磷酸酯转移反应,释放15个核苷酸,4个核苷酸,最后成为稳定的线形产物L19.第15页,共29页,星期日,2025年,2月5日(ppG,pppG)pGoHU-OHG?pUpAG-OHpAU?pU第一次转酯反应第二次转酯反应U?pAG?pU外显子内含子外显子第16页,共29页,星期日,2025年,2月5日GOH3’G5’OH5’3’GOH414G3995’3’3955’3’E1E2I四膜虫RNA的自我剪接5’3’L19RNA具有催化活性的片段第17页,共29页,星期日,2025年,2月5日三、Ⅱ类内含子的自我剪接第18页,共29页,星期日,2025年,2月5日套索结构第19页,共29页,星期日,2025年,2月5日美国科学家,因发现mRNA的剪接于1993年获诺贝尔奖第20页,共29页,星期日,2025年,2月5日RNA的编辑编辑(editing)是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。第21页,共29页,星期日,2025年,2月5日夏普于(PilipA.sharp)1944年出生在美国肯塔基州。60年代,他获得肯塔基联合学院的文学士学位(化学与数学专业)。而后获得伊利诺伊大学博士学位。他先后在加州理工学院的戴维森和冷泉港实验室watson(沃森)手下做过博士后。1974年,他来到麻省理工学院的癌症研究中心。他集中于肿瘤病毒的分子生物学和RNA剪接研究。夏暜关注腺病毒的基因表达过程。他想看看hnRNA和mRNA有什么不同。他利用DNA和RNA杂交的方法找到了二者的不同。他们发现hnRNA明显长于mRNA.mRNA不能与DNA全部杂交。在电子显微镜下发现有三个环。这表明mRNA比DNA小了许多;一个连续的DNA分子包含了没有反映在mRNA中的信息。夏普认为hnRNA中的内含子片断被切除,而外显子片断拼接起来。断
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