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布鲁氏菌Bp26蛋白单克隆抗体制备与生物学特性研究
目录
布鲁氏菌Bp26蛋白单克隆抗体制备与生物学特性研究（1）．．．．．．．．4
一、文档简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.2研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
二、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.1.1布鲁氏菌Bp26蛋白．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.1.2抗体制备相关试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
2.2.1细胞融合技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.2.2抗体制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
2.2.3表达与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
2.2.4免疫学检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
三、单克隆抗体的制备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
3.1消息细胞株的建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
3.2抗体的筛选与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
3.3抗体的纯化与保存．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
四、单克隆抗体的生物学特性研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
4.1抗体的特异性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
4.1.1酶联免疫吸附试验(ELISA)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
4.1.2聚合酶链反应(PCR)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
4.2抗体的亲和力．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
4.2.1离子交换色谱．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
4.2.2亲和层析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
4.3抗体的稳定性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
4.3.1热稳定性测试．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
4.3.2酸碱稳定性测试．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37
五、结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
5.1单克隆抗体的制备与纯化结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
5.2抗体的特异性和亲和力结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
5.3抗体的稳定性结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
六、结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．45
6.1研究结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
6.2未来研究方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
布鲁氏菌Bp26蛋白单克隆抗体制备与生物学特性研究（2）．．．．．．．49
一、文档概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．50
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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