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细胞培养工程细胞培养基第1页,共36页,星期日,2025年,2月5日细胞培养工程南开大学药学院*培养基为细胞提供营养成分和关键生物活性物质,支持细胞生长、代谢以及生物学功能活性主要营养成分C源:Glucose,GlutamineN源:游离氨基酸,蛋白质水解物脂类:必需与非必需脂肪酸,胆固醇维生素:水溶性,非水溶性矿物质(包括微量元素)关键生物活性物质细胞贴壁因子,促有丝分裂因子(参照血清成分)在强化营养的同时,蛋白质水解物具有促有丝分裂作用物理条件pH,渗透压,溶解氧(Dissolvedoxygen)细胞培养基第2页,共36页,星期日,2025年,2月5日*细胞培养工业过程的两个阶段细胞扩增(与化学过程催化剂角色相似)产物形成(蛋白质表达)或细胞分化(细胞治疗)不同阶段分别优化细胞培养过程优化充分了解细胞的生理需要和代谢特点生长培养基与生产培养基分别优化结合生物反应器操作,操纵细胞生长与代谢行为,使过程效益(或效率)最大化细胞生长环境优化细胞培养工程南开大学药学院第3页,共36页,星期日,2025年,2月5日在体内,细胞与血液不直接接触,物质交换依赖于庞大的毛细血管网络与细胞间质中的扩散过程胞间质浓度(mM)胞内浓度(mM)Na+14014K+4.0140Ca2+1.20.01Mg2+0.720Cl-1084HCO3-28.310HxPO4y-211SO42-0.51Aminoacids28Lactate1.21.5Glucose56Protein24TotalChemicals(mM)301.8302.2CorrectedOsmolarity(mM)281.3281.3体内细胞间质的化学环境Source:CellCultureBioprocessEng.pp100细胞培养工程南开大学药学院第4页,共36页,星期日,2025年,2月5日生物体液血清血浆胚胎提出物淋巴液蛋白质水解物天然培养基细胞培养工程南开大学药学院*第5页,共36页,星期日,2025年,2月5日*现代培养基类型细胞培养工程南开大学药学院基底培养基(BasalMedia)糖氨基酸脂肪酸,脂类前体维生素,核苷类普通盐类,微量元素pH缓冲体系添加物(Supplements)血清生长因子/载体蛋白质蛋白质水解物(含)血清培养基无血清培养基(Serum-freemedia)第6页,共36页,星期日,2025年,2月5日*培养基比较细胞培养工程南开大学药学院复合(血清)培养基(Complexmedia)血清含量可占到20%成分非完全确定血清植物蛋白质水解物大豆磷脂化学定义培养基(Chemicallydefinedmedia)所有成分明确可能含有基因工程表达的蛋白质多肽生长因子细胞因子载体蛋白第7页,共36页,星期日,2025年,2月5日*培养基比较细胞培养工程南开大学药学院无血清培养基(Serum-freemedia)不含血清成分完全确定成分非完全确定植物蛋白质水解物大豆磷脂无动物成分培养基(Animalcomponent-freemedia)所有成分明确可能含有生长因子细胞因子载体蛋白为了避免动物病毒或朊蛋白污染,无血清培养基或无动物成分培养基已经成为工业标准,贯穿细胞库构建和生产过程。第8页,共36页,星期日,2025年,2月5日*培养基比较细胞培养工程南开大学药学院无蛋白培养基(Protein-freemedia)不含血清不含任何蛋白质成分成分可能含有蛋白质水解物非成分明确脂类或脂肪酸第9页,共36页,星期日,2025年,2月5日细胞培养工程南开大学药学院化学成分F12DMEMD/F12(1:1)CaCl2CaCl2·2H2OCa(NO3)2·4H2OCuSO4·5H2OFeSO4·7H2OFe(NO3)3·9H2OKClMgSO4MgCl2MgCl2·6H2ONaClNaHCO3NaH2PO4·H2ONa2HPO4Na2HPO4·12H2OZnSO4·7H2O33.220.002
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