感染性疾病病原体快速诊断.pptVIP

评价不能够提示临床患者的病变部位不能够根据斑点数量的多少来判断受试者是活动性结核病患者或是潜伏感染者儿童结核的辅助诊断，需要结合临床*第62页，共80页，星期日，2025年，2月5日基因诊断TB特异性位点：1.rRNA基因：高度保守，主要包括23S、16S及5S基因。其中最为常用的是16SrRNA基因。2.插入序列：IS6110和IS1081。3.蛋白编码的基因：65KD热休克蛋白基因(hsp65)、32KD蛋白基因、DnaJ蛋白基因、RNA聚合酶B(rpoB)和MPB64蛋白基因(mpb64）等。基因诊断的意义主要表现在：a.区分TB与其它分枝杆菌；b.检测TB耐药基因；c.提高TB的阳性检出率。*第63页，共80页，星期日，2025年，2月5日TB分子分型技术IS6110-RFLP（插入序列6110限制性片段长度多态性分析）方法目前依然被认为是结核分枝杆菌基因分型的“金标准”。直接重复片段及寡核苷酸多态性分型可变数目串联重复序列及MLVA分型单核苷酸多态性和MLST分型*第64页，共80页，星期日，2025年，2月5日多重耐药结核分枝杆菌检测结核杆菌产生耐药性主要是由不合理用药引起的结核杆菌内抗结核药物作用靶基因突变所致。药敏试验周期长，因此检测耐药基因成为近年来的研究热点。耐药检测包括用PCR扩增基因组内携带的耐药性区域，和进行扩增产物的突变分析。结核分支杆菌耐药性的基因检测技术分为杂交系统和放大系统两大部分。多数放大系统基于杂交系统，其另一部分是PCR扩增技术。*第65页，共80页，星期日，2025年，2月5日临床常见真菌的快速诊断G试验GM试验分子生物学技术*第66页，共80页，星期日，2025年，2月5日标本要求患者早上尚未进行药物静脉治疗时:MB-80：“无热源真空采血管”,静脉抗凝血，采血量2-4ml，30min内送检BET-24A：抽取1mL静脉抗凝血，配1mL1号处理液其它体液如脑脊液﹑胸腹水与血标本要求相同。注意无菌操作*第30页，共80页，星期日，2025年，2月5日内毒素活性定量检测意义G-所致脓毒症早期鉴别诊断指导抗生素正确使用判定抗感染治疗效果帮助判断患者的预后*第31页，共80页，星期日，2025年，2月5日内毒素定量检测的适应症各种急、慢性病理性发热患者各种类型“中重度感染、肝病、休克、肠道疾病、脏器功能衰竭、大手术术后”患者慢性疾病长期卧床、免疫力低下患者急诊及ICU病房收治的生命体征不稳定的患者*第32页，共80页，星期日，2025年，2月5日分子诊断技术检测致病菌PCR技术扩增16srRNA基因鉴定常见致病菌革兰阳性球菌革兰阴性杆菌mecA基因VanA/VanB基因PBP2b基因PCR扩增耐药基因特异性基因ESBLs基因AmpC基因碳青霉烯酶基因mecA：耐甲氧西林葡萄球菌属（MRS）特异性基因VanAVanB：耐万古霉素肠球菌（VRA）特异性基因PBP2b：青霉素不敏感肺炎链球菌（pNSSp）特异性基因ESBLs基因：主要包括TEM、SHV、CTX-M、OXAAmpC基因包括质粒介导型和染色体诱导型。其中前者主要包括MOX、CMY、DHA、ACC、ACT、FOX等亚型，后者主要包括：ADC。碳青霉烯酶基因：A类酶，以KPC为代表；金属酶，以IMP、VIM、NDM为代表；D类酶，以OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-48为主。*第33页，共80页，星期日，2025年，2月5日16SrRNA具有多拷贝多信息的特点*第34页，共80页，星期日，2025年，2月5日结核分枝杆菌的快速诊断是引起结核病的病原菌。它可侵犯全身各器官，但以肺结核为最多见。结核病至今仍为重要的传染病。估计世界人口中1/3感染结核分枝杆菌。结核分枝杆菌生长缓慢，一般需2-4周长成肉眼可见的落菌。抗酸染色法是检测TB的传统方法，但存在假阳性因此，快速诊断对TB至关重要。*第35页，共80页，星期日，2025年，2月5日结核感染现状全球范围内结核病疫情急剧恶化结核病与艾滋病同时流行结核菌耐药现象益发严重人口大规模流动我国是世界上仅低于印度的第二结核病大国结核菌感染率44.5%新发活动性结核患者130万/年死亡13万/年早期快速诊断与治疗成为制约结核病控制的关键常规实验室诊断结核病方法阳性率不到60%*第36页，共80页，星期日，2025年，2月5日全球结核疫情*第37页，共80页，星期日，2025年，2月5日结核检测方法一、现有实验室常规