生物组织中还原糖等的鉴定.pptx

生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

实验用品

1、仪器/器具：显微镜，水浴锅，电子天平，载玻片，盖玻片，试管，试管夹，试管架，双面刀片，镊子，滴管，研钵，研杵，吸水纸。

2、材料:苹果、花生种子、鸡蛋，马铃薯。

3、试剂:斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液+乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ染液、双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液+B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）、碘液、体积分数为50%的酒精溶液、蒸馏水。

一、还原糖的鉴定

1.将苹果去皮、切块，取5g放入研钵，加5mL水研磨，用单层纱布进行过滤。

2.取样液2mL加入试管中;

3.向试管中加入2mL新制的斐林试剂，震荡摇匀，观察溶液颜色;

4.将试管放在水浴锅中（50~65°C）加热约2分钟，观察溶液颜色的变化。

二、脂肪的鉴定

1.切片:花生种子浸泡、去皮、将子叶切成薄片，取最薄的薄片，放在载玻片中央;

2.染色:在子叶薄片上滴2~3滴苏丹III染液，染色3分钟，用吸水纸吸去周围染液;

3.去浮色:加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色，再用吸水纸吸去多余的酒精溶液;

4.制成临时装片:在薄片上滴1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片;

5.观察:低倍镜下寻找已着色颗粒，移至视野中心，换用高倍镜观察，观察被染色的脂肪组织颜色变化。

三、蛋白质的鉴定

1.将新鲜鸡蛋用镊子轻轻敲碎蛋壳，用滴管吸取0.5mL蛋清加入到试管中，取5mL蒸馏水将蛋清稀释，用滴管吹打均匀；

2.取2mL蛋清稀释液于试管中，向试管中加入双缩脲试剂A液1mL，摇匀;接着向试管中滴加B液3~4滴，摇匀，观察试管中颜色变化情况。

注意：先加A液再加B液。

实验结果和原理

还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀

脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色or脂肪+苏丹Ⅳ→红色

蛋白质+双缩脲试剂→紫色

因此，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。

头脑风暴

1、哪种试剂使用时现用现配？

斐林试剂

2、脂肪鉴定实验中用什么洗去浮色？

50%酒精

3、在蛋白质的鉴定中为什么要先加A液？

营造碱性环境

4、哪一种试剂检测蛋白质？

双缩脲试剂