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显微镜的使用
及微生物的形态观察;实验内容;由一组光学放大系统、调节系统及机械支持系统组成。;用显微镜观察肉眼看不到的微生物,但大多数微生物用高倍镜也看不清,需要用油镜(100×)观察。用油镜观察时,镜头必须浸入香柏油里。;显微镜的使用示意图;实验内容;微生物的形态观察;个体形态;细菌的三种典型形态;球菌的典型形态-金黄色葡萄球菌;;;杆状细菌代表1-大肠杆菌;螺旋菌的典型代表-钩端螺旋体;细菌的特殊结构-鞭毛;微生物第二大类-放线菌;放线菌轮生菌丝;螺旋菌丝;放线菌菌丝及孢子丝;;霉菌菌丝的典型结构-2。根霉的假根及孢子囊孢子;霉菌菌丝的典型结构-
3.青霉的青霉穗;;;微生物的第四大类:酵母菌
;实验要求;菌落形态;菌落形态特征;观察要求;放线菌菌落(产水溶性色素);放线菌菌落(产脂溶性色素);放线菌菌落(产脂溶性色素);;注意事项;注意事项;思考题;;;实验目的
染色原理
染色方法
实验材料
实验内容与步骤
注意事项
实验结果;微生物染色;实验目的
学习微生物的染色原理、染色的基本操作技术,从而掌握微生物的一般染色法和革兰氏染色法。
;实验目的
染色原理
染色方法
实验材料
实验内容与步骤
注意事项
实验结果;二、染色原理
由于微生物细胞含有大量水分,对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大,机体是无色透明的,与周围背景没有明显的反差,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。
微生物细胞是由蛋白质、核酸等两性电解质及其他化合物组成。所以,微生物细胞表现出两性电解质的性质。两性电解质兼有碱性基和酸性基,在酸性溶液中离解出碱性基呈碱性带正电。在碱性溶液中离解出酸性基呈酸性带负电。
经测定,细菌等电点pH在2-5之间,故在中性、碱性或偏酸性溶液中,细菌的等电点均低于上述溶液的pH值,所以细菌带负电荷,容易与带正电荷的碱性染料结合,故用碱性染料染色的较多。微生物体内各结构与染料结合力不同,故可用各种染料分别染微生物的各结构???便观察。;实验目的
染色原理
染色方法
实验材料
实验内容与步骤
注意事项
实验结果;三、细菌染色法:;负染色;三、染色方法
简单染色法
简单染色法又叫作普通染色法,只用一种染料使细菌染上颜色,如果仅为了在显微镜下看清细菌的形态,用简单染色即可。;(二)复染色法
用两种或多种染料染细菌,目的是为了鉴别不同性质的细菌,所以又叫鉴别染色法。主要的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法。
革兰氏染色法:不仅能观察到细菌的形态,而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。细菌对革兰氏染色的不同反应,是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。;实验目的
染色原理
染色方法
实验材料
实验内容与步骤
注意事项
实验结果;四、实验材料
1.显微镜、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸、接种环、载玻片、酒精灯等。
2.石炭酸复红染液、草酸铵结晶紫染液、碘液、95%乙醇、蕃红染液
3.菌种:金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌
;染色染料简介;酸性染料的离子带负电荷,能与带正电荷的物质结合。
中性染料是碱性染料和酸性染料的结合物,故又称复合染料。;实验目的
染色原理
染色方法
实验材料
实验内容与步骤
注意事项
实验结果;;细菌的简单染色步骤
涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥→镜检
1.涂片
取干净的载玻片于实验台上,在载玻片的中央滴一滴无菌蒸馏水,将接种环在火焰上烧红,待冷却后从斜面挑取少量菌种(金黄色葡萄球菌或枯草杆菌)与玻片上的水滴混匀后,在载玻片上涂布成一均匀的薄层,涂布面不宜过大。
2.干燥
涂片最好在室温下使其自然干燥,有时为了使之干得更快些,可将标本面向上,手持载玻片一端的两侧,小心地在酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形。;;3.固定
固定常常利用高温,手持载玻片的一端,标本向上,在酒精灯火焰外层尽快的来回通过2~3次,共约2~3秒钟,并不时以载玻片背面加热触及皮肤,不觉过烫为宜(不超过60℃),放置待冷后,进行染色。
4.染色
在涂片薄膜上滴加染色液(石炭酸复红、草酸铵结晶紫或美蓝任选一种)一滴,使染色液覆盖涂片,染色约1min。
5.水洗
斜置载玻片,在自来水龙头下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。
6.
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