基因工程-高考生物一轮复习讲义（人教版）解析版.pdfVIP

[高中生物一轮复习教学讲义选修3]

第27讲基因工程

考点一基因工程的3种基本工具

1.基因工程的概念：指按照人类的意愿，进严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物

新的遗传特性，从而创造出更符合人类需要的新的生物类型和生物产品。(外源基因在受体表达的原因三点:

DNA结构相同；中心法则；密码子)

2.限制性核酸内切酶(限制酶)——“分子手术刀”

(1)来源及化学本质：主要是从原核生物中分离纯化出来的，化学本质是蛋白质。(原核生物中的限制酶:

没有切割为点或者有切割位点是被保护起来了甲基化)

⑵功能：催化DNA中特定的磷酸二酯键断裂。

(3)作用特点：特异性，即限制酶可识别特定的脱氧核甘酸序列，切割特定的位点。(回文序列)

(4)结果：产生黏性末端或平末端。(如图所示)。(命名：生物属名的头一个字母与种名的头两个字母什

么型菌的第几个限制酶)

EcoRi-GAA；TTC--GAATTC-

在（G与A-CTT；AAG--CTTAAG-

之间切割）：f

黏性末端

中轴线

„-CCC；GGG--CCCGGG-

T

Smal।►

在（G与C-GGG;CCC--GGGCCC-

之间切割）j

中轴线平末端

切割DNA分子时产生的两种不同末端

(箭头表示酶的切割位置)

3.DNA连接酶——“分子缝合针”

(1)种类：E.coliDNA连接酶和TDNA连接酶。

4

(2)作用：将双链DNA片段缝合起来，恢复被限制酶切开的两个核昔酸间的磷酸二酯键。Eco〃DNA连

接酶只能连接黏性末端；T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端

4.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

；(1)最常用载体：质粒

(1)类型〔(2)其他载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒

(2)具备条件：①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制；②有一个至多个限制酶的切割位点，以便于与

外源基因连接；③具有标记基因，用于重组DNA的检测和鉴定；

(3)特点：可以在细胞中进自我复制或整合到染色体DNA上随染色体DNA进同步复制。

①所有的运载体都具有容易侵入受体细胞的特点，并且能够复制。

②天然质粒必须经过人工改造后才能作为载体。

③基因工程中的载体与细胞膜上参与物质运输的载体不同。基因工程中的载体通常是质粒，还有入噬

菌体的衍生物、动植物病毒等，其本质是DNA,能将目的基因导入受体细胞内；细胞膜上的载体是蛋白质,

与细胞膜的功能有关。

5.限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关酶的分析比较

名称作用部位作用底物形成产物

带黏性末端或平末