药品检验技术Drugtestingtechnology74.pptx

药品检验技术Drugtestingtechnology严谨检测药品，保障健康安全授课专业：分析检验技术Major:AnalyticaltestingtechnologyAnalyticalTestingTechniquesRepository分析检验技术资源库AnalyticalTestingTechniquesRepository

项目7-2：任务1：基本原理任务3:在药物检验中的应用任务2:基本操作流程薄层色谱法AnalyticalTestingTechniquesRepository分析检验技术资源库AnalyticalTestingTechniquesRepository

任务一基本原理薄层色谱法（TLC）系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层色谱扫描仪进行扫描，用于鉴别、检査或含量测定。思考：薄层色谱是气相色谱还是液相色谱，为什么

任务一基本原理4流动相（展开剂）起始线溶剂前沿分离机制：混合物中各组分的吸附能力的差异，分离过程：吸附→解吸→再吸附→再解吸→无数次洗脱→分离固定相：硅胶流动相（展开剂）：有机溶剂分离机制：液-固吸附色谱原点

任务一基本原理5

1.化合物A在薄层板上从原点迁移7.6cm,溶剂前沿距原点16.2cm。①计算化合物A的Rf？②在相同的薄层系统，溶剂前沿距原点14.3cm，化合物A的斑点应在此薄层板上何处？写出公式、计算过程、结果、不用抄题作答正常使用主观题需2.0以上版本雨课堂主观题10分

任务一基本原理Rf值的特点当色谱条件一定时，组分的Rf值为一常数，为0～1。若Rf=0，表示斑点在原点不动；若Rf=1，表示斑点随展开剂迁移至溶剂前沿，《中国药典》（2015年版）：除另有规定外，杂质检查时，各杂质斑点的比移值Rf以在0.2～0.8为宜。

任务一基本原理Rf影响比移值的因素固定相温度组分性质流动相8

任务一基本原理9色谱中，溶质的保留和分离选择性决定于三个因素：溶解能力流动相溶质吸附剂吸附作用极性组分（二）吸附剂与展开剂的选择竞争

任务一基本原理（二）仪器与材料1.常用的固定相硅胶（最常用）氧化铝聚酰胺

任务一基本原理硅胶H薄层硅胶的种类硅胶H不含黏合剂硅胶H硅胶G含有黏合剂硅胶H硅胶GF254含有粘合剂含有能够在254nm下产生荧光的荧光剂

药典实例

任务二基本操作流程铺板点样展开显色若用预制板，可不铺版若斑点本身有颜色，可不显色薄层色谱操作流程薄层预制板

第任务二基本操作流程（二）仪器与材料仪器和材料铺板硅胶（常用硅胶G）研钵CMC-Na（事先制成3—5%的水溶液）玻璃板

任务二基本操作流程自动铺板仪将1份固定相（如硅胶G）和3份水或加有黏合剂的水溶液，如0.2%～0.5%羟甲基纤维素钠水溶液（CMC-Na）在研钵中按同一方向研磨混合，去除气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2～0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干后，在105～110℃烘30分钟，随即置于有干燥剂的干燥箱中备用。一、铺板

任务二基本操作流程仪器和材料活化活化：烘箱（105-110℃）活化30分钟后放入干燥器课堂活动：你知道为什么硅胶需要活化？干燥器

任务二基本操作流程常用的吸附剂——硅胶硅胶吸附作用：氢键作用吸附强度：硅醇基数目活化：105-110℃左右（除水）O—Si—O—Si—OHOOOO硅醇基17

任务二基本操作流程二、点样毛细管点样针（手动点样）18薄层-全自动点样仪样品薄层板点样针

任务二基本操作流程19注意：点样速度要快，防止斑点扩散太大，点样的直径不宜太大，一般2～3mm即可。不同样品溶液不能混用点样针，以免交叉污染。手动点样过程1-2cm1-2cm溶剂前沿1-2cm

任务二基本操作流程三、展开双槽层析缸展开过程在通风橱中进行（注意环保，用后的实际不能随便倒掉，要放在专用的回收瓶中！！！）层析缸盖子密封性要好；展开之前先“饱和”（将薄层板在无展开剂一侧静置15-30分钟，此过程又叫预平衡），其目的是防止边缘效应；尽量用新配制的展开剂，展开剂不能浸过点样原点展开过程中不要随意移动层析缸展开至溶剂前沿时及时拿出薄层板，在通风橱中晾干

任务二基本操作流程展开过程

任务二基本操作流程22vvvv展开操作应注意的问题231检查层析缸密闭性展开前——先饱和，防止边缘效应展开时，注意展开剂不要浸到点样线vvvv

任务二基本操作流程四显色方法1-化学显色法喷雾显色（化学显色法）内装化学显色剂（如Fecl3试液））常用的显色剂1.Fecl3试液—含有酚羟基化