DB51_T1081-2010_饲料中赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法_四川省.docxVIP

ICS

DB51

备案号：28171-2010

四川省地方标准

DB51/T1081—2010

饲料中赭曲霉毒素A的测定

高效液相色谱法

DeterminationofochratoxinAinfeeds

High-performanceliquidchromatography

四川省质量技术监督局发布

DB51/T1081-2010

目次

前言…………………………II

1范围…………………………1

2规范性引用文件……………1

3原理…………………………1

4试剂和溶液…………………1

5仪器与设备…………………2

6试样制备……………………2

7分析步骤……………………2

8结果计算……………………2

9精密度………………………3

附录A…………………………4

I

DB51/T1081-2010

前言

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。

本标准由四川省质量技术监督局批准。

本标准由四川省饲料工作总站负责起草。

本标准起草人：柏凡、赵立军、李云、高庆军、甄阳光、张静。

II

DB51/T1081-2010

饲料中赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了测定饲料中赭曲霉毒素A的含量的高效液相色谱法(HPLC)。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及饲料原料的测定。

本标准中赭曲霉毒素A的检出限为30μg/kg。

2

规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1饲料采样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3原理

试样经甲醇-水提取，离心、过滤后，取滤液经过免疫亲和柱净化，浓缩，用高效液相色谱仪-荧光

检测器检测，外标法计算赭曲霉毒素A的含量。

4.1甲醇：分析纯、色谱纯。

4.7提取液：甲醇+水=80+20（体积比）。

4.9磷酸盐缓冲液（PBS）：称取8.0g氯化钠、1.44g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾，溶

于1000mL水，用盐酸或氢氧化钠溶液调pH至7.0。

4.11赭曲霉毒素A标准品：含量大于98%。

4.11.1标准贮备液：精密称取10mg赭曲霉毒素A标准品，用乙腈溶解、定容至100mL，此贮备液

浓度为100μg/mL，置于冰箱中2～8℃保存，有效期6个月。

4.11.2标准工作溶液：分别准确移取赭曲霉毒素A贮备液，用流动相配制成标准工作溶液：0.001

μg/mL，0.01μg/mL，0.1μg/mL，0.5μg/mL，1.0μg/mL，5.0μg/mL。置于冰箱中2～8℃保存，有效期

1个月。

注1:凡接触赭曲霉毒素A的容器，需浸入4%次氯酸钠（NaOCl）溶液，放置半天后清洗备用。

注2:为了安全，分析人员操作时须带上医用乳胶手套，在通风橱内操作。

1

DB51/T1081-2010

4.11.3赭曲霉毒素免疫亲和柱。

5仪器与设备

5.1分析天平：感量0.1mg。

5.2

超声波清洗器。

5.3离心机：转速为5000r/min以上。

5.4

超纯水处理器。

5.5涡旋混合器。

5.6高效液相色谱仪：配备荧光检测器。

5.7氮吹仪。

5.8

0.45μm滤膜。

6试样制备

按GB/T14699.1规定采集试样后，按GB/T20195规定，选取具有代表性的实验室样品1kg，四分法缩

减分取200g左右，粉碎过1mm孔筛，混匀装入磨口瓶中备用。

7分析步骤

7.1

试样溶液的制备

提取

7.1.1

称取