临床凝血检验标准化.pptxVIP

凝血检验的标准化

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主要内容

■标本处理的标准化

■检测系统的标准化

■室内质控与室间质评

■申请与报告的标准化

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一、标本采集、处理的标准化

凝血检验标本的分析前误差来源：

■采集顺序、添加剂使用错误(添加剂污染);

■采集不顺利(血液凝固、采集量不足、溶血);

■特殊人群(红细胞压积过高);

■标本处理不当(保存时间、温度、离心不当);;

2

2

凝血项目/血小板功能;

2.添加剂污染

■抗凝剂污染：

a.肝素污染：

表现：APTT、T显著延长，PT接近正常

机制：肝素抑制凝血因子活化，PT试剂含肝素拮抗剂；

鉴别：鱼精蛋白纠正试验、爬虫酶时间;

□凝血时间均不凝，大量肝素污染?血清标本?

鉴别：待测血浆与正常血浆1:1混合检测TT,若

TT可凝集，提示血清标本；TT仍不凝集，提示肝

素污染。;

3.标本凝固

出现下列结果应检查标本是否有凝块：

■PT/APTT显著缩短或延长；

■FIB水平显著减低；

■D-dimer水平显著升高；

注：即使没有肉眼可见的凝块，也不能排除微小凝块(或小凝块体外降解),排查方法：混匀标本后放置2小时，再测D-dimer水平，若继续升高提示存在体外凝血激活与继发纤溶，标本不合格。;

4.标本溶血

■严重溶血标本建议退还，除非患者体内存在溶血，若不能确定原因，可备注并报告；

■溶血的影响：

a.释放组织因子，导致凝血激活、消耗；

b.干扰光学法检测；

我们的临床研究提示重度机械性溶血对凝血常规(磁珠法)的干扰仍可接受：;

5.标本脂血

■严重脂血标本建议退还，除非患者为高脂血症，若不能确定原因，可备注并报告；高速离心可避免脂血干扰；

■脂血的影响：

a.活化VII因子；

b.各项因子水平及血小板功能水平降低；

我们的临床研究提示重度脂血对凝血常规(磁珠法)的干扰仍可接受：;

.抗凝剂比例过高(枸橼酸钠抗凝血)

a.红细胞压积(HCT)55%:

病例2-4:抗凝剂量调整公式C=1.85×10-3(100-H)×V

C:抗凝剂的ml数。V:全血的ml数。H:Hct;;

7.标本存放时间、温度

■血浆存放时间：

PT、APTT等凝血常规：室???6~8h不影响医学决定；

■血浆存放温度：

不可2-8℃冷藏

激肽酶冷激活一消耗FVII、FXI一凝血时间延长;

0

羊

-20

f

-30

◆—FVIII:C(4C)…

…FVIII:C(25C)

▲FIX:C(4C)

·△…FIX:C(25C)

-60;

8.血浆离心要求

■乏血小板血浆：

推荐：1500g10-15min

若仅用于凝血常规检测，离心时间可酌情缩短；转速不建议超过1500g,避免血小板激活和溶血；

乏血小板血浆验证(对狼疮抗凝物检测特别重要):

●每年至少一次；

●凝血标本使用的每台离心机；

●按规定离心方法，所得血浆中血小板数量应10×109L;

■富血小板血浆：

推荐：170g15min

常用范围：150-200g10-15min;

二、检测系统的标准化

■方法

■试剂

■仪器

■人员;

1.凝血酶原时间(Prothrombintime,PT)

■乏血小板血浆中加入组织因子、磷脂和钙，激活外源凝血途径，导致血浆凝固所需的时间。

■最初被用于评估凝血酶原(Ⅱ因子)水平而得名，之后发现对V、VII、X及纤维蛋白原均敏感。

■应用：筛选外源凝血因子缺陷及口服抗凝药检测

■试剂特点：通常含足量磷脂和肝素拮抗剂，受狼疮抗凝物、肝素影响小。;

■更换仪器、试剂或试剂批号时：

1.检测20例正常人PT,计算获得PT几何均值；

2.更新ISI值(通过定标或生产商提供);

3.验证仪器INR值计算是否无误；;

2.活化部分凝血活酶时间

(Activatedpartialthromboplastintime,APTT)

■乏血小板血浆中加入接触活化物、磷脂和钙，激活内源凝血途径，导致血浆凝固所需的时间。

■“活化”:

指试剂中加入了接触活化物(如硅土、白陶土、鞣花酸);

■“部分凝血活酶”:

1.试剂中只有磷脂没有组织因子(凝血活酶最初被认为就是组织因子+磷脂);

2.该试剂不能使血友病血浆凝固。

■应用：筛选内源因子缺陷及抗凝物质(肝素、狼疮抗凝物)等;

APTT对凝血因子缺乏的敏感度调查：

CLSI的H47-A2建议临床实验室评估其

PT、APT试剂对凝血因子缺乏的敏感性，特别是APT应对30%的FVIII、FIX、FXI水平敏感，因为这可能与显著升高的出血风险相关。

将定标血浆与乏因子血