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异形芽孢杆菌产碱性磷酸酶的分离鉴定及其优化条件研究
目录
一、文档概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
（一）研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
（二）研究目的与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
（三）研究方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
（一）实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
异形芽孢杆菌菌株．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
基础培养基．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
碱性磷酸酶标准品．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
其他试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
（二）实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
菌种分离与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
酶活性的测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
分离条件的优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
酶学性质的研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
三、异形芽孢杆菌产碱性磷酸酶的分离与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
（一）菌种分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
采样与接种．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
斜面接种法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
初代培养与分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
（二）菌种纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
倾斜摇瓶分离．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
丁达尔试验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
减速离心法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
离子交换色谱纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
电泳技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
四、异形芽孢杆菌产碱性磷酸酶的酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
（一）基本原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
（二）酶活性的标准曲线建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38
（三）酶活性的测定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
五、异形芽孢杆菌产碱性磷酸酶的分离条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．40
（一）培养基的选择与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40
营养成分的确定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
培养基的配制比例．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
培养条件优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
（二）接种方式的选择与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．43
六、异形芽孢杆菌产碱性磷酸酶的酶学性质研究．．．．．．．．．．．．．．．．44
（一）酶的最适pH值．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．48
（二）酶的热稳定性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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