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华北农学报２０２５ꎬ４０(１):２９—３５

大豆ＧｍＷＲＫＹ４４生物信息学分析及功能验证

黄友举ꎬ于泳波ꎬ逄翠晶ꎬ孙轼絮ꎬ路晨ꎬ于延冲

(青岛农业大学生命科学学院ꎬ山东省高校植物生物技术重点实验室ꎬ山东青岛２６６１０９)

摘要:ＷＲＫＹ是植物特有的一类转录因子ꎬ在非生物胁迫应答、种子休眠与发芽、生长发育等方面起重要作用ꎮ为揭示

大豆ＷＲＫＹ转录因子家族中ＧｍＷＲＫＹ４４基因的功能和潜在的分子机制ꎬ对大豆Ｗｉｌｌｉａｍｓ８２中ＧｍＷＲＫＹ４４基因进行了生物

信息学分析及功能验证ꎮ结果表明ꎬＧｍＷＲＫＹ４４基因ＣＤＳ全长１０７７ｂｐꎬ编码３５８个氨基酸ꎻ结构预测与进化分析结果显示ꎬ

其编码的蛋白质二级结构由２３.４６％α￣螺旋、４.７５％β￣折叠、５８.９４％无规则卷曲和１２.８５％延伸链构成ꎬ三级结构与二级结

构相统一ꎻ含一个保守的ＷＲＫＹ结构域ꎬ锌指结构为ＣＨ类型ꎬ属ＷＲＫＹＩＩｃ亚家族ꎻ该基因是拟南芥ＡｔＷＲＫＹ７１的同源基

２２

因ꎬ相似度为３５.５６％ꎬ两者具有相似的基因结构ꎮＲＴ￣ｑＰＣＲ分析表明ꎬＧｍＷＲＫＹ４４响应盐胁迫ꎬ表达量先下降后上升ꎮ在盐

胁迫下ꎬ野生型(Ｃｏｌ￣０)和ＧｍＷＲＫＹ４４过表达拟南芥株系的萌发率和根长均受到一定程度抑制ꎬ但ＧｍＷＲＫＹ４４过表达株系明

显优于Ｃｏｌ￣０ꎮ另外ꎬ在盐处理后ꎬＧｍＷＲＫＹ４４过表达株系生长受抑制程度低于Ｃｏｌ￣０ꎮ生理指标分析发现ꎬ在盐胁迫下ꎬＧｍ￣

ＷＲＫＹ４４过表达株系的超氧化物歧化酶(ＳＯＤ)、过氧化物酶(ＰＯＤ)和过氧化氢酶(ＣＡＴ)活性显著高于Ｃｏｌ￣０ꎬ而丙二醛

(ＭＤＡ)含量显著低于Ｃｏｌ￣０ꎮ以上表明ꎬＧｍＷＲＫＹ４４过表达可以提高转基因拟南芥的耐盐性ꎮ

关键词:大豆ꎻＧｍＷＲＫＹ４４ꎻ基因克隆ꎻ生物信息学分析ꎻ功能验证ꎻ盐胁迫

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中图分类号:Ｓ５６５.０３ꎻＱ７８文献标识码:Ａ文章编号:１０００７０９１(２０２５)０１００２９０７

ｄｏｉ:１０.７６６８/ｈｂｎｘｂ

ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＢｉｏｌｏｇｙＦｕｎｃｔｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＳｏｙｂｅａｎＧｍＷＲＫＹ４４

ＨＵＡＮＧＹｏｕｊｕꎬＹＵＹｏｎｇｂｏꎬＰＡＮＧＣｕｉｊｉｎｇꎬＳＵＮＳｈｉｘｕꎬＬＵＣｈｅｎꎬＹＵＹａｎｃｈｏｎｇ

(ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＱｉｎｇｄａｏＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆ

ＰｌａｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅꎬＱｉｎｇｄａｏ２６６１０９ꎬＣｈｉｎａ)

Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＷＲＫＹｉｓａｕｎｉｑｕｅｃｌａｓｓｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓｉｎｐｌａｎｔｓꎬｗｈｉｃｈｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｐｌａｎｔａｂｉｏｔｉｃ

ｓｔｒｅｓｓｒｅｓｐｏｎｓｅꎬｓｅｅｄｄｏｒｍａｎｃｙａｎｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎꎬｇｒｏｗｔｈａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬｅｔｃ.Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｒｅｖｅａｌｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｕｎｄｅｒｌｙ￣

ｉｎｇｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＧｍＷＲＫＹ４４ｇｅｎｅｉｎｓｏｙｂｅａｎＷＲＫＹｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｆａｍｉｌｙꎬｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓａｎｄ

ｂｉｏｌｏｇｙｆｕｎｃｔｉｏｎｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｏｙｂｅａｎＷｉｌｌｉａｍｓ８２ＧｍＷＲＫＹ４４ｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄ.ＧｍＷＲＫＹ４４ｇｅｎｅｗａｓ１０７７ｂｐｉｎｌｅｎｇｔｈ

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