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电离辐射防护与辐射源安全基本标准
关于药学院同位素实验室申请豁免的报告
设备处:
因科研工作需要,我院需要建立一个同位素实验室,用于放射性同位素的相关实验研究。
我院结构生物学实验室的重要课题——《基于结构的pde抑制剂设计和研究》受到国家自然科学基金(面上项目)、中国博士后基金(面上项目和特别资助)及XX省自然科学基金(面上项目)的资助,该实验将继续进行至少3年的时间,主要使用3h标记的camp或cgmp作为示踪底物测定环核苷酸磷酸二酯酶pde酶活性。另外,我院药理毒理学、药物化学等学科也需要迫切需要使用放射性同位素3h进行科学研究。
基于上述目的,目前我院已经购买了一台perkinelmertri-carb2910tr液体闪烁分析仪,以方便开展同位素实验。该仪器目前由药学院中心实验室管理,可对外开放,校内外各单位老师都可在仪器负责人的监管下,在符合国家相关法律法规规定的情况下使用。根据我们的预期,拟建立的同位素实验室将采用一般湿式操作进行实验。预计放射性核素的最大等效日操作量低于2×107bq,
10最大等效年操作量低于10bq。
目前,根据国家《电离辐射防护与辐射源安全基本标准》中规定的第三类丙级实验室场所的卫生防护要求,我院已在药学院大楼顶层东侧一间实验室进行了室内表面装修、通风系统的改造及购置了如辐射监测仪等相关配套设备;工作人员已经接受了由XX省环境保护局举办的辐射安全培训班的培训,取得了辐射工作安全许可证;对于放射性试剂的购买、使用及放射性废物的处理,我们也将遵循环保部门和中山大学的相关规定严格执行。
鉴于我们拟使用的同位素活度较低,且是在组织良好、人员训练有素的实验室进行医学研究,因此特申请豁免。
望批准。谢谢。
附件:pde活性测定方法
pde活性测定方法
1.2μl0.20μm氚代底物3h-camp或者3h-cgmp(sigma-aldrich,usa,20000-30000cpm/assay)用assaybuffer1(组成20mmtris·hcl,10mmmgcl2,1mmdtt,ph值为7.5)或者assaybuffer2(组成20mmtris·hcl,4mmmncl2,1mmdtt,ph值为7.5)稀释至60μl。
2.加入40μl已用assaybuffer1或者assaybuffer2稀释的蛋白质缓冲液。
3.混合液在25℃下静置反应15min。
4.依次加入200μl0.2mznso4和200μl0.2mba(oh)2溶液,振荡混合。
5.将混合物离心(14000rpm,5min)。
6.取上清液430μl加入3.5mlliquidscintillationcocktails(scintisafeplustm50%,fisherscientific,usa)7.振荡混合后用petricarb2910计数器测量混合物。
8.camp水解率控制在20-35%。
关于测定的说明:
1.所有反应均在25℃下进行。
2.所有容器均为一次性用品,无需洗涤。用完后按有无放射性分类收集。对有放射性的废物,按固体、液体分别收集。无放射性污水从下水道排出。
3.放射性操作均在指定位置进行,每次完成实验后需测定各操作位置的辐射情况,并记录。
4.操作应小心谨慎。若不慎有放射性溶液溅出,需采用吸水纸擦拭,直至监测到的残留辐射强度降至正常控制值以下。
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