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北京pcr考试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的中文名称是（）

A.基因测序技术

B.聚合酶链反应技术

C.蛋白质印迹技术

D.核酸分子杂交技术

答案：B

2.在PCR反应中，哪种酶起到关键的合成新DNA链的作用（）

A.限制性内切酶

B.DNA连接酶

C.TaqDNA聚合酶

D.逆转录酶

答案：C

3.PCR反应的三个基本步骤不包括（）

A.变性

B.退火

C.延伸

D.转录

答案：D

4.以下哪种物质不是PCR反应的必需成分（）

A.模板DNA

B.四种脱氧核苷酸（dNTPs）

C.RNA聚合酶

D.引物

答案：C

5.PCR反应中，变性的温度一般为（）

A.50-60℃

B.70-80℃

C.90-95℃

D.100-110℃

答案：C

6.在PCR反应中，引物的作用是（）

A.提供起始合成的3′-羟基

B.提供起始合成的5′-磷酸基

C.切割DNA模板

D.连接DNA片段

答案：A

7.PCR反应的退火温度主要取决于（）

A.模板DNA的长度

B.引物的长度和序列

C.Taq酶的活性

D.dNTPs的浓度

答案：B

8.如果PCR产物出现非特异性扩增，可能的原因不包括（）

A.引物设计不合理

B.退火温度过低

C.模板DNA纯度高

D.循环次数过多

答案：C

9.对于高GC含量的模板进行PCR扩增时，可采取的措施不包括（）

A.提高退火温度

B.加入助溶剂如DMSO

C.降低模板浓度

D.增加延伸时间

答案：D

10.实时荧光定量PCR主要用于（）

A.定性检测DNA

B.定量检测DNA或RNA

C.克隆基因

D.构建基因文库

答案：B

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术在以下哪些领域有广泛应用（）

A.疾病诊断

B.法医鉴定

C.基因克隆

D.生物进化研究

答案：ABCD

2.以下哪些因素会影响PCR反应的特异性（）

A.引物的特异性

B.退火温度

C.模板的纯度

D.Taq酶的活性

答案：ABC

3.PCR反应体系中，dNTPs的作用包括（）

A.作为合成DNA的原料

B.提供能量

C.维持反应体系的pH

D.稳定DNA结构

答案：AB

4.在设计PCR引物时，需要考虑的因素有（）

A.引物长度

B.引物的GC含量

C.引物的特异性

D.引物的退火温度

答案：ABCD

5.PCR产物的纯化方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳切胶回收

B.柱层析法

C.磁珠法

D.有机溶剂萃取法

答案：ABC

6.以下关于实时荧光定量PCR的描述正确的是（）

A.可以实现对起始模板的定量分析

B.有荧光染料法和荧光探针法两种检测方式

C.具有特异性强、灵敏度高的特点

D.只能检测DNA不能检测RNA

答案：ABC

7.导致PCR反应失败的可能原因有（）

A.模板DNA质量差

B.引物设计错误

C.反应体系配制错误

D.仪器故障

答案：ABCD

8.在进行高保真PCR时，可选用的聚合酶有（）

A.PfuDNA聚合酶

B.TaqDNA聚合酶

C.KODDNA聚合酶

D.VentDNA聚合酶

答案：ACD

9.PCR技术的发展趋势包括（）

A.提高反应的特异性和灵敏度

B.实现高通量检测

C.与其他技术联用

D.降低成本

答案：ABCD

10.以下关于PCR引物设计软件的说法正确的是（）

A.PrimerPremier是常用的引物设计软件

B.可以帮助设计具有合适长度、GC含量等的引物

C.能预测引物的退火温度

D.只能用于设计DNA引物不能用于RNA引物

答案：ABC

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应可以无限循环，循环次数越多产物越多。（）

答案：错误

2.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反应。（）

答案：错误

3.引物的3′端与模板的互补性比5′端更为重要。（）

答案：正确