发酵过程控制技术生物技术及应用80课件.pptxVIP

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-------菌体浓度、营养基质的影响及其控制;一、菌体浓度的影响及其控制;遗传特性。取决于细胞结构的复杂性和生长机制，细胞结构越复杂，分裂所需的时间就越长。典型的细菌、酵母、霉菌和原生动物的倍增时间分别为45min、90min、3h和6h左右，这说明各类微生物增殖速率的差异。

菌体的增长还与营养物质和环境条件有密切关系。各种碳源和氮源等成分和它们的浓度。上限浓度、基质抑制（渗透压、关键酶）。一些营养物质的上限浓度(g／L)如下：葡萄糖100、NH4+5、PO43-10。

影响菌体生长的环境条件有温度、pH值、渗透压和水分活度等因素。;在适当的比生长速率下，发酵产物的产率与菌浓成正比关系，即=QPmX

——发酵产物的产率(产物最大生成速率或生产率)，g/(L·h)；

QPm——产物最大比生成速率，h-1；

X——菌体浓度，g/L。;摄氧速率OUR与传氧速率OTR相平衡时的菌体浓度，即临界菌体浓度c(X)临（X临）。菌体超过此浓度，抗生素的比生成速率和体积产率都会迅速下降。(为什么？);控制适当的菌体浓度是发酵成败的关键;据Monod方程，在分批发酵中菌体比生长速度是基质浓度的函数。在SKs的情况下，菌体比生长速率与基质浓度呈线性关系。

不同菌株对基质浓度的耐受能力不一样。基质过浓导致抑制作用。当葡萄糖浓度低于100-150g/L，不出现抑制作用；当葡萄糖浓度高于350-500g/L，多数微生物不能生长，细胞出现脱水现象。

;基质浓度也严重影响代谢产物的生成量。如果培养基过于丰富，菌体生长过旺，黏度增大，传质差，菌体不得不花费较多的能量来维持其生存环境，即用于非生产的能量大量增加。对发酵产物合成不利，最终导致发酵转化率降低。因此控制合适的基质浓度。;营养物浓度小于10Ks(营养物饱和常数)时，?是S的函数，当S10Ks，?接近?max，当?成为?max，S的增加不再影响?;在生长偶联型发酵中，趋向Qpmax与?max的变化一致

?随S浓度增加而加大，达到?max时不再受S的影响

当S下降时，?也随之下降;在部分生长偶联型发酵中，产物生成后于生长：当?趋向?max，然后趋向0时，Qp仍增加直到最大。

Qp与营养物浓度饱和值无关：即营养物浓度不饱和的限制作用只影响?，而不影响Qp

稳定期前营养物浓度控制目的是保持最大?，稳定期内营养物浓度控制产物形成最大浓度;举例：基质浓度对生成量和组成的影响

黑曲霉柠檬酸发酵

蔗糖浓度15%-18%，蔗糖同化率97%

蔗糖浓度20%，只同化92%

蔗糖浓度低于10%，产柠檬酸少，积累草酸

蔗糖浓度低于2.5%，不产柠檬酸;影响菌体按比例、均匀地吸收营养物和环境pH的稳定

影响菌体生长，影响产物量和组成;１）碳源对发酵的影响及其控制

迅速利用的碳源能较迅速地参与代谢、合成菌体和产生能量，并产生分解代谢产物，有利于菌体生长，但有的分解代谢产物阻遏产物合成；

缓慢利用的碳源多数为聚合物，为菌体缓慢利用，有利于延长代谢产物的合成。例如，乳糖、蔗糖、麦芽糖、玉米油及半乳糖分别是青霉素、头孢菌素C、盐霉素、核黄素及生物碱发酵的最适碳源。;控制碳源的浓度：

经验法：根据不同代谢类型来确定补糖时间、补糖量和补糖方式。

动力学法：根据菌体的比生长速率、糖比消耗速率及产物的比生成速率等动力学参数来控制。;2;For青霉素：

现象：在迅速利用的葡萄糖培养基中，菌体生长良好，但青霉素合成量很少；相反，在缓慢利用的乳糖培养基中，青霉素的产量明显增加。缓慢滴加葡萄糖以代替乳糖，仍然可以得到良好的结果。

说明：糖的缓慢利用是青霉素合成的关键因素。乳糖被缓慢利用的速度恰好适合青霉素合成的要求。

结论：合理使用迅速利用的碳源；

发酵培养基中采用混合碳源。

;2）氮源对发酵的影响及其控制

影响产物合成的方向和产量

如：

谷氨酸发酵——

NH4+供应不足，促使形成α-酮戊二酸；

NH4+过量，促使谷氨酸转变成谷氨酰胺。

因此要控制适量的NH4+浓度

;迅速利用的氮源：氨基(或铵)态氮的氨基酸(或硫酸铵等)和玉米浆等；容易被菌体所利用，促进菌体生长，但对某些代谢产物的合成，特别是某些抗生素的合成产生调节作用，影响产量。

缓慢利用的氮源：黄豆饼粉、花生饼粉、棉子饼粉等蛋白质。延长次级代谢产物的生产期、提高产物的产量。一次投入全量容易促进菌体生长和养分过早耗尽，以致菌体早衰自溶，缩短产物的生产期。;生产上采用的方法：

设计发酵培养基：选用含有快速利用和慢速利用的混合氮源。

;三、磷酸盐浓度的控制