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*形态各异的菌落无菌技术1、概念泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。获得纯净培养物的关键（目的）:防止外来杂菌的入侵。2、无菌技术包括的四个方面（措施）（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。3、消毒与灭菌（1）消毒①概念：使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。②常用方法:a、煮沸消毒法100℃煮沸5-6minb、巴氏消毒法70-75℃下煮30min或80℃下煮15min条件：条件：用于一般物品的消毒。适用范围：适用范围：对一些不耐高温的液体，如牛奶的消毒。d、紫外线消毒紫外线照射30min适用范围：c、化学药剂消毒酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等，如酒精擦拭双手、氯气消毒水源等。条件：只适用于表面灭菌和空气灭菌，例如接种室、接种箱或超净工作台。（2）灭菌?概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。?常用方法:a、灼烧灭菌用于金属用具（接种环、接种针）、接种过程中试管口和瓶口的灭菌；条件：在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧。适用范围：b、干热灭菌所用设备是干热灭菌箱操作方法及注意事项：装入待灭菌的物品将待灭菌的物品，如塞上棉塞的试管、锥形瓶、培养皿、吸管等玻璃仪器，用牛皮纸或干净的报纸包裹严密后，放入干热灭菌箱。注意，物品不要摆得太挤，以免妨碍热空气流通。同时，灭菌物品也不要与干热灭菌箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦起火。↓灭菌关好干热灭菌箱的箱门，旋动恒温调节器，设定温度为160~170℃。当温度升到150℃左右时，保持此温度3～4h。由于干热灭菌温度较高，操作时要注意防止烫伤。↓降温关掉电源，自动降温↓开箱取物等温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。注意温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。c、高压蒸汽灭菌121℃，100kPa，15-30分钟。用于培养基、无菌水等的灭菌，所用设备是高压蒸汽灭菌锅。操作方法及注意事项：首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架平齐。↓放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。锥形瓶与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞。↓加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓，注意要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气。↓加热灭菌锅，打开排气阀，使水沸腾，排除锅内的冷空气。等冷空气完全排尽后关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐步上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，按照灭菌所要求的时间，维持压力。↓到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲出容器，造成污染。*
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