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专题32基因工程
考点分布1重点难点备考指南
1.基因工程的生理解掌握质粒的类型和特点。
1.基因工程的基本工具
2.基因工程的原理及技术(含理解并掌握基因工程用的两种酶的作用。
2.基因工程的基本操作及
PCR技术)理解掌握基因工程的操作步骤和注意事
其应用
3.基因工程的应用项。
3.蛋白质工程及应用
4.蛋白质工程掌握蛋白质工程的流程
考点一基因工程的操作工具
知识梳理:
1.基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋
予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因
工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。基因工程的变异原
理是基因重组。
2.基因工程的基本工具
(1)限制性内切核酸酶(简称限制酶)。主要来自原核生物。具有专一性,断裂特定的两个
核昔酸之间的磷酸二酯键。产生黏性末端或平末端
①原核生物中存在限制酶的意义是什么?
原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全,防止外来病原物的危害。
②限制酶来源于原核生物,为什么不能切割自己的DNA分子?
限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经
被修饰。
(2)DNA连接酶
①作用:将限制酶切割下来的DNA片段拼接成新的DNA分子,恢复被限制酶切开的两个脱氧
核昔酸之间的磷酸二酯键。
②类型
常用类型E•coliDNA连接酶TDNA连接酶
4
来源大肠杆菌T噬菌体
特点只缝合黏性末端缝合黏性末端和平末端
DNA连接酶和DNA聚合酶不是一回事。原因是:①DNA连接酶连接的是两个DNA片段,而DNA
聚合酶是把单个的脱氧核甘酸连接到已有的DNA片段上。②DNA聚合酶起作用时需要以一条
DNA链为模板,而DNA连接酶不需要模板。
(3)载体
①种类:质起、动植物病毒、噬菌体等。
②质粒的特点:有一个或多个限制酶切割位点、能自我复制、有特殊的标记基因。
③运载体的作用:携带外源DNA片段进入受体细胞。
1.与DNA有关的酶的比较
名称作用部位作用结果
限制酶磷酸二酯键将DNA切成两个片段
DNA连接酶磷酸二酯键将两个DNA片段连接为一个DNA分子
DNA聚合酶磷酸二酯键将单个脱氧核甘酸依次连接到单链末端
DNA(水解)酶磷酸二酯键将DNA片段水解为单个脱氧核昔酸
解旋酶碱基对之间的氢键将双链DNA分子局部解旋为单链
2.图解限制酶的选择原则
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