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生化实验2电泳;实验

思路;生物化学教研室朱欣婷

生物化学教研室朱欣婷

电场强度越大或支持物越短，电流将随之增加，产热也增加，影响分离效果。

离子强度如果过低，缓冲液的缓冲容量小，不易维持pH恒定

生物化学教研室朱欣婷

I越大，电动电势越小，u越小；

生物化学教研室朱欣婷

α1－球蛋白

血清蛋白依次分为清蛋白，

离子强度如果过低，缓冲液的缓冲容量小，不易维持pH恒定

生物化学教研室朱欣婷

生物化学教研室朱欣婷;2.缓冲溶液：;电场强度：电泳支持物上每厘米的电位降，也称电势梯度。;4.支持介质：;负极;

（一）按支持物的物理性状不同，区带电泳可分为：

1．滤纸及其它纤维(如玻璃纤维、醋酸纤维、聚氯乙烯纤维薄膜)电泳

2．粉末电泳：如纤维素粉、淀粉电泳；

3．凝胶电泳：如琼脂、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳；

4．丝线电泳：尼龙丝、人造丝电泳。;（二）按支持物的装置形式不同，区带电泳可分为：;(三)按pH的连续性不同，区带电泳可分为：

1．连续pH电泳：即整个电泳过程pH保持不变，如常用的纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳等。

2．非连续pH电泳：缓冲液和电泳支持物间有不同的pH的电泳，如聚丙烯酰胺凝胶盘状电脉，等电聚焦电泳等。

;（二）血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳;【实验原理】;血清蛋白依次分为清蛋白，

球蛋白的α1、α2、β、γ五个区带;

膜条经过氨基黑10B染色后显出清晰色带。;3.血清蛋白电泳结果的临床意义：;1．准备与点样：;;;;1．计算出各部分蛋白质占总蛋白质的百分数。

清蛋白％＝（2A/∑T）×100％

α1球蛋白％＝（α1/∑T）×100％

α2球蛋白％＝（α2/∑T）×100％

β球蛋白％＝（β/∑T）×100％

γ球蛋白％＝（γ/∑T）×100％;I越大，电动电势越小，u越小；

2．非连续pH电泳：缓冲液和电泳支持物间有不同的pH的电泳，如聚丙烯酰胺凝胶盘状电脉，等电聚焦电泳等。

4mol/LNaOH

1．在本实验电泳过程中，正负电极各发生什么反应?电极附近的缓冲液有什么变化?

电泳后各区带应明显分开,如分离不清或不整齐,试分析其可能存在的原因。

简单绘制血清蛋白电泳后的谱图。

血清蛋白电泳结果???临床意义：

4．丝线电泳：尼龙丝、人造丝电泳。

pH值：(pH-pI)越大，Q越多，u越大

在进行高压电泳的时候必须用冷却装置，否则可引起蛋白质等样品发生热变性而无法分离。

球蛋白的α1、α2、β、γ五个区带

蛋白条带

层析技术的分类及各自的原理。

生物化学教研室朱欣婷

90,000～150,000

（一）按支持物的物理性状不同，区带电泳可分为：

γ－球蛋白;1．在本实验电泳过程中，正负电极各发生什么反应?电极附近的缓冲液有什么变化?

2.电泳时，点样端置于电场的正极还是负极？为什么？

3.除利用电泳法分离蛋白质以外,还有哪些分离方法?

4.简单绘制血清蛋白电泳后的谱图。

5.电泳后各区带应明显分开,如分离不清或不整齐,试分析其可能存在的原因。

;1.蛋白质的理化性质？

2.蛋白质的盐析？

3.蛋白质的显色反应有哪些？

4.分离蛋白质的方法有哪些？

5.层析技术的分类及各自的原理。

6.透析的原理？;感谢观看