血浆凝血酶原时间测定标准操作规程.pdfVIP

血浆凝血酶原时间测定标准操作程序

1目的

本程序检测血浆凝血酶原时间（PT），是临床上最常用的外源凝血系统筛选试验。

PT与APTT、PLT组合作为手术患者术前常规检查项目，用以测定患者的止凝血功能。

2原理和方法

2.1在待检血浆中加入过量的组织凝血活酶和适量的钙离子，使凝血酶原转变为凝血酶，

后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，血浆浊度及粘稠度增加，直至血浆凝固。测定血浆

凝固过程的时间即为PT。

2.2采用光学散射比浊法检测血浆的凝固时间。

3性能特征

3.1精密度：正常血浆批内CV＜0.8%；病理血浆批内CV＜0.9%。正常血浆批间CV＜2.2%；

病理血浆批间CV＜3.1%。

3.2检测范围：8-320秒（s）。

4标本采集与处理

4.1标本采集

4.1.1常规静脉采血2.7ml，置于含109mmol/L（即31.2g/L）枸橼酸钠溶液0.3ml

的专用真空采血管，条形码贴于相应试管上，立即轻轻颠倒混匀3次以上，使抗凝充分。

4.1.2应将试管刻度的可能误差控制在既定体积的10%以内，按血9份与抗凝剂1份比

例混合，比例要准确。

4.1.3所谓血液与抗凝剂按9:1比例混合，实际上是指抗凝剂与正常压积血液的血浆之

间的比例而言。但当HCT＜20%或＞55%时，应纠正细胞与血浆之比例，根据患者红细胞

比容（HCT）结果调整抗凝剂用量。校正公式：抗凝剂用量（ml）0.00185×血量（ml）

×（100-患者红细胞比容）

4.1.4标本采集后及时运送至检验科。专人负责标本的接收扫描，对不合格标本予以拒

收。

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4.1.5下列标本为不合格标本

4.1.5.1抗凝剂比例不准确、凝固或有凝块产生的全血标本。

4.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重脂浊的标本。

4.1.5.3无条形码、条形码涂改或打印不清无法识别的标本。

4.1.5.4影响检验结果准确度，怀疑稀释或肝素等污染的标本。

4.1.5.5HCT＜20%或＞55%，未进行抗凝比例校正的标本。

4.1.5.6其他如标本试管破裂等。

4.2标本保存

4.2.1标本保存时间：室温4h；0℃24h；-20℃2周；-70℃半年。注意：不能放置

4～8℃环境（Ⅶ因子易被冷激活）。

4.2.2如不能在4小时内完成检测，应将血浆标本低温保存（-70～-20℃），检测前将

血浆于37℃快速融化，融化后在2小时内完成测定。

4.3标本采集的注意事项和患者准备

4.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

4.3.2避免止血带的压力过大，束缚时间过长，否则可影响检验结果。

4.3.3静脉穿刺技术熟练，抽血顺利，以防止组织损伤，组织因子进入针管。

4.3.4抗凝比例要准确，混匀要充分（颠倒混匀），标本必须无凝块。

5仪器和试剂

5.1仪器：美国ACLTOP700型自动血液凝固分析仪。

5.2试剂：含钙组织凝血活酶试剂盒。由美国InstrumentationLaboratory公司出品，

试剂盒产品号0020003000。

5.2.1试剂组成：组织凝血活酶、钙离子

5.2.2试剂准备：放置室温平衡至少15min后根据试剂说明书复溶试剂，加入20mlRTF

Diluent，轻轻转动混匀，放置室温15～20min后上机使用。

5.2.3试剂保存：保存在4℃冷藏直至失效期。复溶后试剂置ACLTOP700试剂仓15℃

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可稳定10天。

5.3质控品：美国BIO-RAD公司提供正常、异常质控血浆，严格按说明书复溶、使用。

5.4校准品：美国InstrumentationLaboratory公司原装配套校准血浆，严格按说明

书复溶、使用。

5.5其他用品：反应杯、冲洗液、清洗液等。

6环境和安全控制

6.1环境要求：温度要求15-32℃；湿度要求5-85%。

6.2安全控制：要求一级生物安全实验室内进行检测。

7校准程序

7.1校准品准备：每瓶准确加1.0ml注射用水复溶，轻轻旋转摇匀，室温放置30min待

充分溶解后使用，60min内完成校准。

7.2校准条件

7.2.1当试剂批号发生变化时；

7.2.2更换重要的光学或液压元件之后；

7.2.3当质量控制程序提示时。

7.3校准程序