2025年分子生物学新版题库.docVIP

七、问答题

1．阐述原核生物转录终结。

(1)转录终结两种关键机制是什么?

(2)描述翻译如何能调整转录终结。

(3）为什么在细菌转录终结中极少包含到Phｏ因子?

(4)如何能阻止转录终结?

2.复制DＮA聚合酶（DNA依托ＤNA聚合酶)也有校正功效，解释为什么RNＡ聚合酶没有这种功效。

3.讨论原核生物基因体现聚合作用反映定向关键性。假如核糖体从3’端到５’端读它模板mRNA话,那么将会发生什么情况？

４.概括细菌细胞内转录过程。

5.概括经典原核生物开启子结构和功效,并解释什么是保守序列。

６.转录如何在基因或基因组末端终结?

7．(１)如何辨别由开启子起始转录RNＡ片段和5’端被加工过RNA片段;

(2）证实多肽是从氨基端到羧基端方向合成。

8．比较Ｅ．ｃｏlirRNＡ和tＲNＡ转录和加工。

9．辨别可诱导和可阻遏基因调控。

1０．衰减作用如何调控Ｅ.coli中色氨酸操纵子体现?

11．比较并指出细菌和真核生物RＮＡ翻译机理异同。

１2.什么是摇摆假说?

13.指出E.ｃolｉ和真核生物翻译起始不一样。

１4.Ｓ．ＮCohen于19７３年构建了三个重组体,ｐSC102,pＳC1０5，ｐＳC109请阐明这三个重组体是如何取得？各阐明了什么?

１5.基因克隆是如何使具备单个基因DNA片段得到纯化？

16.什么是细菌限制—修饰系统(restrictｉon-ｍodificatｏnｓｙstem，R-Msｙｓｔem)

17.细菌限制—修饰系统有什么意义?

1８.阐明限制性内切核酸酶命名原则要点。

19.Ⅰ类限制酶具备哪些特点?在基因工程中有什么作用?

20.Ⅲ类限制酶有哪些特点?

21.何谓限制性内切核酸酶切割频率?

２2．什么是限制性内切核酸酶星号活性？受哪些因素影响？

23．双酶消化法(dｏubｌｅｄigｅsts)绘制限制性内切核酸酶酶谱原理。

24.什么是DNA多态性(DNApｏｌymorｐhism)?

２5.限制性片段长度多态性（reｓｔriｃtｉonfragmｅｎtｌengｔhpｏlymｏrphism,ＲFLＰ）。

２6．计算以下三种酶各自在某染色体DＮA序列上识别位点间平均距离:

AluⅠ:5’AＧCT3”ＥcｏＲⅠ:5’ＧAＡTTC３’

３TCGA5’3’CTTAGG5’

AcyⅠ:5’GPｕCＧＰｙＣ3’

３’CPyGCPｕ5’

（注:Pｙ=任何一个嘧啶;Pu=任何一个嘌呤)

图15.1酶切电泳图谱1～2：HindⅢ切割；3～4：ＥcoRV切割；5～6：HindⅢ+ＥcoRV；

图15.1酶切电泳图谱

1～2：HindⅢ切割；3～4：ＥcoRV切割；5～6：HindⅢ+ＥcoRV；

1、3、5是质粒DNA：2、4、6是15号克隆。

图15.2用EcoRⅠ、HpaⅡ单独切割及用这两种酶混合切割30kb

BamHⅠ片段产生DNA带

(1）绘制具备插入片段和不含插入片段时pBＰl限制性图谱,并标明四环素抗性基因位置—;

(2）假如用克隆在另一个和pＢP1完全不一样源载体上四环素抗性基因作为探针，进行Ｓoutheｒn印迹杂交，估量上述电泳图会出现什么样杂交带?

(3）假如用克隆15果蝇ＤＮA片段作为探针进行Ｓoutｈem印迹杂交,放射自显影成果又是如何?

2８．为什么大多数内切酶被称为“限制”酶。

２９.据Sｃiｅｎcｅ杂志报道:一个关键遗传疾病可由导致ＤNA中碱基代替诱变剂在体外进行人工诱导。设计一个迅速用以鉴定疾病基因型检测方法。

３0．为了绘制长为3．0kｂBaｍHⅠ限制性片段限制性图谱,分别用ＥｃoRⅠ、HpaⅡＥcoRⅠ十ＨｐaⅡ消化这一片段三个样品，然后经过凝胶电泳分离DＮＡ片段，溴化乙锭染色后观测DNA带型(图15.2)。请依照这些成果,绘制一个限制性图谱,要标明E．coＲⅠ和HｐaⅡ识别位点间相对位置,和它们之间距离（kｂ)。

31．１9６7年,有5个实验室几乎同时独立发现了DNA连接酶,每个实验室实验有什么特点?

32．简述DNA和ＲNA连接酶催化反映机制。

33.影响DNA连接酶催化连接反映因素有哪些?

３4.什么是Ｋlenoｗ酶？有哪些活性?在基因工程中有什么作用？

35.如何运用T4DＮA聚合酶制备3’隐含末端或双链平末端?

36.如何运用T4DNＡ聚合酶进行双链DNA３’末端标记？

37.如何运用T４DＮA聚合酶制备平末端?

３８．反转录酶有两种类型，一是起源于禽类骨髓母细胞瘤病毒(AMY,aviam