家蚕幼虫体内抗氧化活性物质成分筛选及非靶向代谢组学分析.pdfVIP

11月November昆虫学报http://

2024,67(11):1461-1474ACTAENTOMOLOGICASINICAdoi:10.16380/j.kcxb.2024.11.003

家蚕幼虫体内抗氧化活性物质成分筛选

及非靶向代谢组学分析

三晖*

谢岩，孙志超，高妍夏，周玲，刘麟菲，王

（承德医学院蚕业研究所，河北省高校特色蚕桑应用技术研发中心，承德067000）

摘要：【目的】分析家蚕Bombyxmori幼虫体内天然主效抗氧化成分的类别、作用效果和单体组成，

为其开发利用以及药效作用的研究提供参考。【方法】以2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）

二铵盐[2，2-azino-bis

（2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH）自由基的清除能力测定3个桑树品种（禾叶白、冀桑2号和

）叶以及取食冀桑2号叶片的4个家蚕品种（菁松×皓月、东肥、彩3和彩4）5龄幼虫蚕砂和

全蚕体的提取液的抗氧化能力（antioxidantcapacity，AC）；采用分光光度法和反相高效液相色谱-紫

外检测法(reverse-phasehigh-performanceliquidchromatographywithultravioletdetection,RP-HPLC-

UV）测定全部提取液的总黄酮、总酚、多糖和1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，1-DNJ）的含量，

分析幼虫全蚕体的主效抗氧化活性物质；检测6个家蚕品种（东肥、安四无花、彩甘、7903、彩0和

彩3）末龄（3眠蚕的4龄，4眠蚕的5龄）幼虫每日血淋巴中的总酚含量和清除ABTS自由基的AC

（ACABrs）；采用液相色谱-质谱联用技术（liquidchromatograph-massspectrometer，LC-MS）对4个家

蚕品种（菁松×皓月、东肥、彩3和彩4）5龄最后1d幼虫全蚕体和冀桑2号叶片抗氧化活性物质

成分进行非靶向定性和定量解析。【结果】桑叶提取液的总黄酮、总酚和多糖含量与提取液的AC

呈现极显著正相关，5龄幼虫蚕砂和全蚕体提取液中总黄酮和总酚含量与其提取液的AC呈极显著

正相关。4个家蚕品种5龄最后1d幼虫全蚕体提取液的ACABTs

2.12）mgVC/g］和ACppPH［（16.77±0.47）~（23.43±2.34）mgVC/g】分别是冀桑2号叶片提取

液的1.46~2.38和1.81~2.54倍，也分别是5龄最后1d

1.23~7.73倍，5龄最后1dmg/g]

与冀桑2号叶提取液的［（19.74±0.58）mg/g］和5龄最后1d幼虫蚕砂的［（10.19±0.19）~

（16.74±0.24）mg/g】接近，而5龄最后1d幼虫全蚕体提取液中总黄酮和1-DNJ的含量显著低

于冀桑2号叶和5龄最后1d幼虫蚕砂提取液中的，上述数据显示总酚是5龄最后1d幼虫全蚕体

提取液中起抗氧化作用的主要成分。6个家蚕品种末龄幼虫每日血淋巴ACABTs值和总酚含量呈极

显著正相关，进一步证实总酚是蚕体的重要抗氧化成分。在4个家蚕品种5龄最后1d幼虫全蚕

体和冀桑2号叶片中共鉴定到436个代谢物，相关性和主成分分析（principalcomponentanalysis，

PCA）显示436个代谢物含量差异能够有效区分桑叶和全蚕体、彩4和其他3种家蚕的全蚕体，375

个差异代谢物聚类分析结果显示5龄最后1d幼虫全蚕体提取液中含量高于冀桑2号叶的单体物

质主要属于苯及其衍生物,有机酸、有机氧和有机氮化合物,特定的酚类和氨基酸的单体组成是5

龄最后1d幼虫全蚕体提取液AC高于摄入冀桑2号叶提取液的主要原因。【结论】本研究证实家

蚕5龄最后1d幼虫全蚕体抗氧化能力高于冀桑2号叶片和蚕砂，酚类是家蚕的主要天然抗氧化

剂，家蚕对摄食桑叶物质选择性吸收和转化形成其特有的抗氧化物质组份，解