项目三灭活剂佐剂和保护剂63课件.pptVIP

单相乳化佐剂（1）油包水（W/O）较粘稠，在机体内不易分散；但佐剂活性优良，为生物制品所采用的主要剂型（2）水包油（O/W）较稀薄，在机体内易于分散；但佐剂活性很低，生物制品中不采用。双相乳化佐剂又分为水包油包水和油包水包油型粘度小，注射局部反应轻微，易吸收和佐剂效应高弗氏不完全佐剂是由低引力和低粘度的矿物油及乳化剂组成的一种贮藏型佐剂。弗氏完全佐剂在不完全佐剂的基础上加一定量的分枝杆菌或卡介苗而成。虽然具有一定的副作用，但其佐剂活性是其它物质难于相比的。弗氏佐剂的特点可使在正常状态下缺乏免疫原性的物质成为免疫原。先作用于Th1细胞，后是Th2细胞，并能启动细胞免疫而发挥作用。国外常用白油：Drakocel-6VR、Marcol-52和Lipolul-4国内常用白油：7号或10号白油质量标准:无色无味；50℃运动粘度7m2／s左右；紫外吸收值（250-350）＜0.1％，紫外消光系数＜12×108；单环芳烃与双环芳烃含量低于0.5％，无多环芳烃；小鼠腹腔注射0.5ml观察160d或家免皮下注射2.0ml白油观察60d，表现正常。白油佐剂（1）剂在水中法：将乳化剂直接溶于水中，在激烈搅拌下将油加入，可直接生成O/W乳剂。若欲得W/O型，可继续加入油，直到发生变型。该法通常用匀浆器或胶体磨，高速搅拌而得到较好的乳剂。油乳佐剂乳化方法（2）剂在油中法：将乳化剂溶于油相，将油相直接加入水相中得O/W，如水相直接加入油相，得到W/O型，如欲得O/W，继续加入至变型。该法制成的乳剂，一般均匀颗粒直径在0.5μm左右，比较稳定。免疫实验动物用的佐剂配制:(1)弗氏佐剂：矿物油75%~85％，乳化剂15％~25%，混合后经除菌过滤而成为FIA；如向其中加入0.5mg／m1死结核杆菌即为FCA。使用时，将含抗原的水相，与上述任一佐剂等量混合，用力振摇即可成为均匀的乳剂。(2)白油佐剂：9份油和1份Span-80混合后加2％Tween-80和1％~2%硬脂酸铝，经高压灭菌后备用，注射前将配好的油佐剂与抗原水相1：1混合，强力振摇，可配制成性状良好的乳剂疫苗。（1）粘度测定：流出法、Saybolt粘度计法吸管内口直径为1.2mm，室温下吸满lml乳剂，垂直放出0.4ml所需时间作为粘度单位。以2-6S为合格，不得多于10-15S。（2）乳剂稳定性测定：①加速老化法：疫苗于37℃贮存10-30d不破乳。②离心加速分层法：于半径10cm离心管装油乳剂，3000rpm离心15min不分层，相当于保存1年以上不破乳。油乳佐剂检验3、蜂胶佐剂是一种优良的天然药物；具有广泛的生物活性和药理作用（抗菌、抗病毒、抗肿瘤、消炎）；具有免疫增强作用：能保持抗原特性，增强巨噬细胞的吞噬能力，促进抗体的产生，提高机体的特异性和非特异性免疫力。（1）蜂胶的处理：蜂胶（4℃以下贮存）粉碎过筛按1：4（W/V）加95％乙醇室温浸泡24～48h冷却过滤或离心取上清透明栗色纯净蜂胶浸液4℃以下保存备用除去干渣计算出浸液中含蜂胶量。（2）蜂胶佐剂疫苗的制备：灭活菌液或病毒液，加入蜂胶乙醇浸液，使每毫升菌液中含蜂胶10mg，边加边摇荡，成为乳浊状，即可。蜂胶佐剂疫苗制备方法：1、细胞因子类佐剂细胞因子的概念是机体的各种细胞在其生命周期中所释放的具有不同生物学效应的物质，是免疫细胞间相互作用的调节信号。该类物质相互诱生，相互影响，构成一个巨大的细胞因子网络（cytokinenetwork）系统，各种细胞借助自己所释放的细胞因子完成各自的功能，在免疫应答中发挥作用。七、新型佐剂细胞因子的分类（根据生物活性）经典的细胞因子：淋巴毒素（LT）、肿瘤坏死因子（TNF）、干扰素（INF）2.对体液免疫和细胞免疫具有调节作用的因子：白细胞介素（IL）和集落刺激因子（CSF）1．作为免疫佐剂，提高疫苗的免疫效果2．作为免疫治疗剂，预防和治疗某些病原感染3．通过基因重组，构建新型基因工程疫苗IL-2-AIV-HA重组痘病毒细胞因子的应用几种重要的细胞因子白细胞介素-2（IL-2）白细胞介素-4（IL-4）白细胞介素-12（IL-12）γ-干扰素（IFN-γ）2、CpGDNA