核酸和核苷酸.pptVIP

酶底物作用部位作用产物外切酶磷酸二酯酶DNA，RNA5’端，5’连接处3’核苷酸3’端，3’连接处5’核苷酸内切酶脱氧核糖核酸酶IDNA3’连接处3’-羟核苷酸为3’末端寡核苷酸及剩余部分脱氧核糖核酸酶II5’连接处3’-核苷酸为3’末端寡核苷酸及剩余部分核糖核酸酶T1RNA5’连接处碱基是G3’-鸟苷酸为3’末端寡核苷酸及剩余部分核糖核酸酶I5’连接处碱基是Pyr3’-嘧啶类核苷酸为3’末端寡核苷酸及剩余部分核苷酸序列分析中断裂磷酸二酯键用酶返回第30页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA酶法测序1977年sanger发明末端终止法测定DNA序列根据sanger测序法，现在已经有各种DNA自动测序仪，DNA测序速度大大加快HGP得以提前完成上页下页章首节首第31页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA酶法测序上页下页章首节首第32页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA酶法测序上页下页章首节首平行进行四组反应，每组反应均使用相同的模板，相同的引物以及四种脱氧核苷酸；并在四组反应中各加入适量的四种之一的双脱氧核苷酸，使其随机地接入DNA链中，使链合成终止，产生相应的四组具有特定长度的、不同长短的DNA链。这四组DNA链再经过聚丙烯酸胺凝胶电泳按链的长短分离开，经过放射自显影显示区带，就可以直接读出被测DNA的核苷酸序列,如下图所示：第33页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA酶法测序上页下页章首节首第34页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA酶法测序上页下页章首节首第35页，共79页，星期日，2025年，2月5日四.DNA的高级结构DNA的二级结构DNA的三级结构上页下页章首第36页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA的二级结构DNA的二级结构是双螺旋结构，即两条多聚核苷酸链围绕一个共同轴，相互盘绕在一起构成直径2nm的双螺旋，互补的碱基(A和T互补，G和C互补)通过氢键连接在螺旋内部，碱基平面垂直于右旋的螺旋轴。螺旋结构中两条链走向相反上页下页章首节首2.0nm小沟大沟第37页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA的二级结构类型上页下页章首节首B型结构两条链反向平行，右手螺旋碱基在内（A＝T，G≡C）碱基平面垂直于螺旋轴戊糖在外，双螺旋每转一周为10碱基对（bp）A型结构碱基平面倾斜20o，螺旋变粗变短，螺距2～3nm。Z型结构左手螺旋，只有小沟第38页，共79页，星期日，2025年，2月5日返回第39页，共79页，星期日，2025年，2月5日返回第40页，共79页，星期日，2025年，2月5日稳定DNA双螺旋结构的三种力量氢键：使四种碱基形成特异配对关系，G-C间可形成3对氢键，A-T之间有两对氢键。疏水相互作用：轴向平行相邻的碱基平面自发地相互靠近，从而使碱基缔合、层层堆积，形成了碱基堆积力，它是使DNA结构稳定的主要力量。离子键：磷酸残基上的负电荷与介质中的正离子，如Na+，K+，Ｍg＋等之间形成的离子键。上页下页章首节首第41页，共79页，星期日，2025年，2月5日核酸的三级结构指链状核酸分子的空间构型，即其三维空间排列或组合方式。DNA的三级结构上页下页章首节首第42页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA的三级结构主要有以下三种：松弛环形超螺环形开链环形DNA的三级结构上页下页章首节首第43页，共79页，星期日，2025年，2月5日回文结构与镜像结构特殊DNA的结构上页下页章首节首第44页，共79页，星期日，2025年，2月5日回文结构中的单链可形成发夹结构特殊DNA的结构上页下页章首节首第45页，共79页，星期日，2025年，2月5日双链回文结构可形成十字架结构特殊DNA的结构上页下页章首节首第46页，共79页，星期日，2025年，2月5日DNA和基因组DNA通过自我复制合成出完全相同的分子，从而将遗传信息由亲代传到子代。转录，以DNA为模板合成RNA的过程，碱基配对。mRNA用于指导蛋白质的合成，mRNA的核苷酸的序列决定了蛋白质的氨基酸序列；第47页，共79页，星期日，2025年，2月5日中心法