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基于核酸适体的液体活检新方法：技术突破与临床应用探索

一、引言

1.1研究背景与意义

在现代医学领域，疾病的早期准确诊断对于患者的治疗效果和预后起着决定性作用。传统的组织活检方法虽在疾病诊断中占据重要地位，但存在诸多局限性，如侵入性强、对患者身体造成较大创伤、可能引发并发症，且难以进行多次重复检测，尤其对于一些肿瘤位置特殊或患者身体状况较差的情况，获取足够的组织样本变得极为困难。此外，肿瘤的异质性使得单次组织活检可能无法全面反映肿瘤的真实情况，容易导致误诊或漏诊。

液体活检技术的出现，为疾病诊断带来了新的希望。它通过对血液、尿液、脑脊液等体液样本进行检测，能够获取疾病相关的生物标志物信息，如循环肿瘤细胞（CTCs）、循环肿瘤DNA（ctDNA）、外泌体以及肿瘤血小板等。这种检测方法具有操作简便、创伤小、可重复性强等显著优势，极大地提高了患者的依从性。同时，液体活检能够实时反映肿瘤的动态变化，为疾病的早期诊断、治疗效果评估以及复发监测提供了有力支持，在癌症、神经系统疾病、心血管疾病等多种疾病的诊断和监测中展现出巨大的应用潜力，有望成为未来疾病诊断的重要发展方向。

核酸适体作为一种新兴的分子识别工具，在液体活检技术中发挥着关键作用。核酸适体是通过指数富集的配体系统进化技术（SELEX）从随机寡核苷酸文库中筛选得到的单链DNA或RNA分子，其长度通常在20-100个核苷酸之间。这些分子能够折叠成独特的三维结构，通过与靶分子之间的特异性相互作用，如氢键、范德华力、静电作用等，实现对靶分子的高亲和力和高特异性结合。与传统的抗体相比，核酸适体具有诸多优势。它可以在体外通过化学合成获得，制备过程相对简单、成本较低，且不受免疫原性的限制，能够针对一些难以产生抗体的小分子、毒素以及自身抗原等进行筛选。此外，核酸适体具有良好的稳定性，在不同的温度、pH值和离子强度条件下仍能保持其结构和功能的完整性，便于储存和运输。其尺寸较小，扩散速度快，能够更容易地穿透生物膜和组织间隙，到达靶分子所在位置，提高检测的灵敏度和准确性。同时，核酸适体的修饰和标记相对容易，可以通过各种化学方法连接荧光基团、生物素、纳米颗粒等，用于构建多样化的检测平台，满足不同的检测需求。

基于核酸适体的液体活检新方法，将核酸适体的高特异性识别能力与液体活检的微创、可重复检测优势相结合，为疾病诊断提供了更加精准、高效的手段。通过筛选针对特定疾病生物标志物的核酸适体，并将其应用于液体活检检测中，可以实现对疾病相关生物标志物的高灵敏检测和准确分析，有助于提高疾病的早期诊断率，为患者的及时治疗争取宝贵时间。同时，这种新方法还能够实时监测疾病的发展进程和治疗效果，为个性化治疗方案的制定和调整提供科学依据，具有重要的临床应用价值和广阔的市场前景。深入研究基于核酸适体的液体活检新方法，对于推动医学诊断技术的发展、改善患者的健康状况具有重要的现实意义。

1.2液体活检技术概述

液体活检是一种新兴的非侵入性诊断技术，通过检测体液（如血液、尿液、脑脊液等）中的生物标志物，来获取疾病相关信息，实现对疾病的诊断、监测和预后评估。相较于传统的组织活检，液体活检具有独特的优势，在临床应用中展现出巨大的潜力。

在液体活检中，常用的生物标志物主要包括循环肿瘤细胞（CTCs）、循环肿瘤DNA（ctDNA）、外泌体以及肿瘤血小板等。CTCs是指从原发肿瘤或转移灶脱落，进入血液循环系统的肿瘤细胞。这些细胞具有与原发肿瘤相似的生物学特性，能够反映肿瘤的异质性。通过检测CTCs的数量、形态和分子特征，可以为肿瘤的早期诊断、预后评估以及治疗效果监测提供重要依据。ctDNA则是肿瘤细胞释放到血液中的DNA片段，其携带着肿瘤细胞的基因突变、甲基化等信息。ctDNA的检测可以实现对肿瘤的无创基因检测，有助于发现肿瘤的驱动突变，指导靶向治疗方案的选择，同时也可用于监测肿瘤的复发和转移。外泌体是细胞分泌的一种纳米级囊泡，内含蛋白质、核酸、脂质等多种生物分子。肿瘤来源的外泌体能够参与肿瘤细胞与周围微环境的相互作用，促进肿瘤的生长、转移和耐药。检测外泌体中的生物标志物，如特定的蛋白质、mRNA和miRNA等，对于肿瘤的早期诊断和病情监测具有重要意义。肿瘤血小板是在肿瘤微环境中被激活的血小板，它们能够包裹肿瘤细胞释放的物质，如RNA、蛋白质等。肿瘤血小板的检测可以作为肿瘤诊断和预后评估的潜在生物标志物，为肿瘤的诊疗提供新的思路。

与传统的组织活检相比，液体活检具有诸多显著优势。液体活检属于非侵入性或微创检测方法，只需采集少量的血液、尿液等体液样本，避免了传统组织活检中手术切除、穿刺等操作对患者身体造成的较大创伤，降低了患者的痛苦和感染风险，大大提高了患者