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MIR398天然反义转录本：miR398生物合成调控与植物抗热性机制解析

一、引言

1.1研究背景与意义

在真核生物的复杂生命进程中，微小RNA（microRNA，miRNA）扮演着极为关键的角色。miRNA是一类长度约为21-23个核苷酸的非编码单链小RNA分子，其进化上较为保守。自1993年首个miRNA在线虫中被发现以来，科研人员陆续在多种动植物体内找到了它的踪迹。miRNA主要通过与靶mRNA的互补配对，对靶基因进行翻译抑制或者mRNA剪切，从而实现对基因表达的转录后调控。在植物里，miRNA基因的位置较为多样，有的位于编码基因之间，还有的来自内含子、外显子、转座子，甚至是tRNA区域。它在RNA聚合酶II的作用下转录形成具有帽子和polyA结构的初级转录本pri-miRNA，pri-miRNA具有发夹结构，在Dicer-like1（DCL1）、双链RNA结合蛋白Hyponasticleaves1（HYL1）、C2H2锌指蛋白Serrate（SE）、细胞核capbindingcomplex（CBC）等蛋白形成的剪切复合体的作用下，在细胞核d-bodies内被剪切形成前体pre-miRNA，随后pre-miRNA进一步被剪切形成成熟的miRNA/miRNA双链体。在甲基转移酶Huaenhancer1（HEN1）对其3’端核苷酸进行甲基化修饰后，阻碍了它们的尿苷化和后续降解，甲基化的miRNA/miRNA在Hasty（HST）和其他未知因子的作用下从细胞核运输到细胞质中。多数成熟的miRNA会进入Argonaute（AGO）复合体，并通过碱基互补配对与靶标基因结合，进而调控靶标基因的表达。众多研究表明，miRNA参与了植物生长发育的各个阶段，如种子萌发、根的生长、叶的发育、花的形成以及果实的成熟等，同时在植物应对生物和非生物胁迫过程中也发挥着不可或缺的作用。

天然反义转录本（naturalantisensetranscripts，NATs）是一类广泛存在于动植物基因组中的编码或非编码的RNAs分子，其与正义基因互补，能够在转录水平或转录后水平调节正义基因的表达。在植物中，NATs参与了众多生理过程，包括对植物激素信号传导的调控、生长发育进程的影响以及对各种逆境胁迫的响应等。例如，在激素信号传导方面，某些NATs可以通过调节相关激素信号通路中关键基因的表达，来影响植物对激素的响应；在生长发育过程中，NATs能够调控与植物形态建成、器官发育等相关基因的表达；在应对逆境胁迫时，NATs能够帮助植物感知外界环境变化，并通过调节相关基因表达，增强植物对逆境的适应能力。然而，尽管NATs在植物中具有重要作用，目前学界对于天然反义转录本与miRNA之间的调控关系却知之甚少。

近年来，随着全球气候变暖趋势的加剧，高温胁迫已成为影响植物生长、发育、产量和品质的主要环境因素之一。在高温环境下，植物的生理生化过程会受到显著影响，如光合作用受到抑制，导致植物无法正常合成有机物质；呼吸作用增强，消耗过多的能量；细胞膜稳定性下降，细胞内物质外渗；蛋白质变性和降解加速，影响细胞的正常功能；激素平衡被打破，干扰植物的生长调节等。这些变化最终会导致植物生长发育受阻，甚至死亡，给农业生产带来巨大损失。因此，深入研究植物的抗热机制，挖掘植物自身的抗热潜力，对于提高植物的抗热性、保障农业生产的稳定和可持续发展具有重要的现实意义。

miR398作为植物中广泛存在的一种微小RNA，已被证实参与了植物对多种逆境胁迫的响应过程，其中在植物热逆境响应中的作用备受关注。已有研究表明，miR398在植物受到热胁迫时，其表达水平会发生显著变化，进而通过调控下游靶基因的表达，影响植物的抗热能力。然而，目前关于miR398在植物抗热性中的调控机制尚未完全明确。特别是MIR398天然反义转录本在这一过程中所扮演的角色以及它们之间的相互作用机制，仍然是植物逆境生物学领域亟待解决的重要科学问题。对MIR398天然反义转录本调控miR398生物合成及植物抗热性机制的深入研究，不仅能够丰富我们对植物体内基因表达调控网络的认识，为揭示植物抗热的分子机制提供新的理论依据，还能够为通过生物技术手段改良作物的抗热性提供新的靶点和策略，具有重要的理论意义和实践价值。

1.2研究目的

本研究旨在深入剖析MIR398天然反义转录本对miR398生物合成的调控机制，以及其在植物抗热性方面所发挥的作用。具体而言，将通过一系列实验手段，确定MIR398天然反义转录本与miR398基因之间的相互作用模式，明确这种相互