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2025/07/14生物化学常用的四大技术汇报人：_1751850234
CONTENTS目录01PCR技术02SDS电泳技术03WesternBlot技术04ELISA技术
PCR技术01
技术原理DNA的变性PCR技术首先通过高温使DNA双链解开，形成单链模板，以便后续的引物结合。引物的退火在适当的低温下，引物与单链DNA模板特异性结合，为DNA聚合酶提供起始点。酶促延伸DNA聚合酶在引物结合处开始合成新的DNA链，沿模板链延伸，形成互补的DNA链。循环重复通过多次循环变性、退火和延伸步骤，指数级放大目标DNA片段。
应用实例疾病诊断PCR技术在医学领域用于检测病原体DNA，如HIV和结核分枝杆菌的诊断。遗传学研究通过PCR扩增特定基因片段，科学家可以研究基因突变与遗传疾病之间的关系。
SDS电泳技术02
技术原理蛋白质的电荷性质SDS利用SDS（十二烷基硫酸钠）使蛋白质带负电荷，实现按大小分离。凝胶的分子筛作用聚丙烯酰胺凝胶作为分子筛，根据蛋白质分子大小不同，形成不同的迁移速率。电泳过程中的变性作用SDS结合到蛋白质上，破坏其二级和三级结构，确保蛋白质以线性形式迁移。
应用实例蛋白质纯度检测SDS用于检测蛋白质样品的纯度，通过电泳条带的单一性判断蛋白质是否纯净。分子量估计通过与已知分子量的标准蛋白比较，SDS可以用来估计未知蛋白的分子量大小。疾病诊断在临床诊断中，SDS用于分析血清蛋白，帮助诊断某些疾病，如多发性骨髓瘤。蛋白质表达分析在分子生物学研究中，SDS用于检测基因工程表达的蛋白质，评估表达效率和纯化效果。
WesternBlot技术03
技术原理蛋白质的电泳分离WesternBlot技术首先通过SDS电泳将混合蛋白质按大小分离。蛋白质的转移分离后的蛋白质条带被转移到固相载体如硝酸纤维素膜上，以便后续检测。抗原抗体特异性结合使用特定抗体识别并结合目标蛋白，通过标记的二抗进行可视化检测。
应用实例疾病诊断PCR技术在医学领域用于检测病原体DNA，如HIV和结核分枝杆菌的诊断。遗传学研究通过PCR扩增特定基因片段，科学家可以研究基因突变与遗传疾病之间的关系。
ELISA技术04
技术原理蛋白质的电泳分离WesternBlot技术首先通过SDS电泳分离混合蛋白质样品，根据分子量大小进行排序。蛋白质的转移分离后的蛋白质从凝胶转移到固态膜上，通常使用硝酸纤维素或PVDF膜。抗原抗体特异性结合将目标蛋白与特定的一抗结合，再通过二抗与一抗的特异性反应，实现目标蛋白的检测。
应用实例蛋白质纯度检测SDS用于检测蛋白质样品的纯度，通过电泳条带的单一性来判断。分子量测定通过SDS电泳，可以比较已知分子量的标准蛋白，从而估算未知蛋白的分子量。疾病诊断在临床诊断中，SDS用于分析血清蛋白，帮助诊断某些遗传性疾病。蛋白质组学研究在蛋白质组学研究中，SDS是分离复杂蛋白混合物的重要步骤，为后续质谱分析奠定基础。
THEEND谢谢
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