牛冠状病毒S蛋白生物信息学分析及其受体结合域的多克隆抗体制备.pdfVIP

畜牧与兽医２０２５年第５７卷第８期·６９·

－

韩翔舒，宫震，刘淑悦，等．牛冠状病毒Ｓ蛋白生物信息学分析及其受体结合域的多克隆抗体制备［Ｊ］．畜牧与兽医，２０２５，５７（８）：６９７７．

－

ＨＡＮＸＳ，ＧＯＮＧＺ，ＬＩＵＳＹ，ｅｔａｌ．ＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｂｏｖｉｎｅｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓＳｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｇａｉｎｓｔｉｔｓｒｅｃｅｐｔｏｒｂｉｎｄｉｎｇ

－

ｄｏｍａｉｎｓ［Ｊ］．ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙ＆ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，２０２５，５７（８）：６９７７．

牛冠状病毒Ｓ蛋白生物信息学分析及其受体结合域的

多克隆抗体制备

１２３１３３３

韩翔舒，宫震，刘淑悦，范昊宇，付修龙，李晓卓，梁纤纤，

３２４１∗２∗

郑启铭，李月，平继辉，蒋松，夏俊

（１石河子大学动物科技学院，新疆石河子８３２０６１；

２新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心），新疆乌鲁木齐８３００００；

３新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐８３００００；４南京农业大学动物医学院，江苏南京２１００９５）

摘要：旨在预测和分析牛冠状病毒（ＢＣｏＶ）Ｓ蛋白的结构和潜在功能，并进行克隆表达及多克隆抗体的制备，为疫苗研究和实验室诊断提供基

－＋

础。利用生物信息学软件预测分析Ｓ蛋白生物学特性，克隆其受体结合域（ＲＢＤ）基因并与原核表达载体ｐＥＴ３０ａ（）连接，构建重组质粒后

转化ＢＬ２１感受态细胞并利用ＩＰＴＧ诱导表达，表达的蛋白经镍柱纯化后免疫小鼠，制备多克隆抗体并检测。结果：Ｓ蛋白由１３６４个氨基酸组成，

相对分子质量为１５０８１ｋＤａ，等电点为５５１，不稳定指数为３３２２，脂溶性指数为８７２２；该蛋白１～１３０７ａａ为胞外区，１３０８～１３３０ａａ为跨膜

－

区，１３３１～１３６３ａａ为胞内区，１～１４ａａ为信号肽，３１０～６１２ａａ为ＲＢＤ；有３６个潜在的Ｂ细胞表位，ＲＢＤ中包含１２个；该蛋白α螺旋占

－

２７９５％，β折叠占２３０４％，无规则卷曲占４９０１％；分析Ｓ蛋白三级结构，