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SIAH与YAP对Wnt信号通路的调控机制及结构生物学解析

一、引言

1.1Wnt信号通路概述

Wnt信号通路是一个在生物进化过程中高度保守的复杂蛋白质作用网络，在多种生理和病理过程中扮演着关键角色。该通路的命名源于对果蝇无翅基因（Wingless）和小鼠Int1基因的研究，发现它们在功能和序列上具有相似性，故而将两者合并，命名为Wnt基因，由其调控的信号传导系统被称为Wnt通路。

Wnt信号通路主要由Wnt配体、受体、胞内信号转导分子和转录因子等组成。Wnt配体是一类分泌型糖蛋白，在哺乳动物中，已鉴定出19种不同的Wnt蛋白，如Wnt1、Wnt3a、Wnt5a等，它们在结构上具有一定的相似性，但功能存在差异。Wnt受体主要包括卷曲蛋白（Frizzled，Fzd）家族和脂蛋白受体相关蛋白5/6（LRP5/6）。Fzd是一种七次跨膜蛋白，其胞外的N端有一个富含半胱氨酸的结构域（CRD），能够特异性地与Wnt配体结合；LRP5/6则作为共受体，与Fzd共同参与Wnt信号的传递。当Wnt配体与Fzd-LRP5/6受体复合物结合后，会引发一系列胞内信号转导事件，进而激活下游的不同信号通路。

根据信号转导途径和生物学效应的不同，Wnt信号通路主要分为经典Wnt/β-catenin信号通路和非经典Wnt信号通路。经典Wnt/β-catenin信号通路的标志性事件是β-catenin在细胞质中的积累并进入细胞核，从而调控靶基因的表达。在没有Wnt信号时，细胞质中的β-catenin与由支架蛋白Axin、腺瘤性息肉病蛋白（APC）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）和酪蛋白激酶1α（CK1α）等组成的破坏复合物结合。在该复合物中，CK1α和GSK-3β依次对β-catenin进行磷酸化修饰，使其被β-转导重复蛋白（β-TrCP）识别并结合，随后通过泛素化途径被26S蛋白酶体降解。此时，转录因子T细胞因子/淋巴增强因子（TCF/LEF）与共抑制因子Groucho结合，抑制Wnt靶基因的转录。当Wnt信号激活时，Wnt配体与Fzd-LRP5/6受体复合物结合，促使Fzd募集并激活胞内的散乱蛋白（Dishevelled，Dvl）。Dvl通过抑制GSK-3β的活性，使β-catenin不再被磷酸化和降解，从而在细胞质中稳定积累。随后，β-catenin进入细胞核，与TCF/LEF结合，取代Groucho，招募组蛋白修饰共激活物，如CBP/p300、BRG1、BCL9和Pygo等，形成活性转录复合物，激活Wnt靶基因的表达，这些靶基因参与调控细胞增殖、分化、存活等多种生物学过程。经典Wnt信号通路在胚胎发育过程中起着至关重要的作用，例如在胚胎的体轴形成过程中，β-catenin的不对称分布决定了胚胎的前后轴和背腹轴；在器官发生阶段，该通路参与了心脏、肝脏、肾脏等器官的发育。在成体组织中，经典Wnt信号通路对于维持组织稳态和干细胞的自我更新也具有重要意义，如在肠道中，Wnt信号通路维持着肠干细胞的增殖和分化平衡，保证肠道上皮细胞的持续更新。

非经典Wnt信号通路则不依赖于β-catenin，主要包括平面细胞极性通路（PCP通路）和Wnt/Ca2?通路。PCP通路主要参与调控细胞的极性和定向迁移，在胚胎发育过程中，对于组织和器官的形态建成至关重要，如在果蝇翅膀的发育中，PCP通路调控细胞的极性，使翅膀的毛发生长方向一致；在脊椎动物的神经管发育中，PCP通路控制神经嵴细胞的迁移方向。当Wnt配体（如Wnt5a、Wnt11）与Fzd或其共受体（如ROR-Frizzled）结合后，会招募并激活Dvl蛋白。Dvl通过激活小G蛋白Rho和Rac，进而激活Rho激酶（ROCK）和c-Jun氨基末端激酶（JNK），引起细胞骨架的重排和相关基因的表达变化。此外，Dvl还可以通过激活Daam1，介导肌动蛋白的聚合，进一步影响细胞的形态和迁移。Wnt/Ca2?通路则主要通过调节细胞内钙离子浓度来传递信号，在胚胎发育和细胞生理功能调节中发挥作用，如在心脏发育过程中，该通路参与调控心肌细胞的收缩和节律。在这条通路中，Wnt配体与Fzd受体结合后，通过G蛋白激活磷脂酶C（PLC），PLC水解磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP?）生成三磷酸肌醇（IP?）和二酰基甘油（DAG）。IP?促使内质网释放钙离子，使细胞内钙离子浓度升高；DAG则激活蛋白激酶C（PKC