人源性NKG2D CAR-T细胞在猕猴与食蟹猴体内安全性的深度解析与评估.docxVIP

人源性NKG2DCAR-T细胞在猕猴与食蟹猴体内安全性的深度解析与评估

一、引言

1.1研究背景与意义

癌症作为全球范围内严重威胁人类健康的重大疾病，一直是医学研究领域的重点攻克对象。传统的癌症治疗方法，如手术、化疗和放疗，虽然在一定程度上取得了成效，但对于一些晚期癌症患者或对传统治疗方法耐药的患者，治疗效果往往不尽人意。近年来，细胞免疫疗法作为一种新兴的癌症治疗手段，为癌症患者带来了新的希望，其中人源性NKG2DCAR-T细胞疗法备受关注。

人源性NKG2DCAR-T细胞疗法，是通过基因工程技术，将编码嵌合抗原受体（CAR）的基因导入T细胞中，使T细胞能够特异性识别并杀伤表达NKG2D配体的肿瘤细胞。NKG2D是一种在自然杀伤细胞（NK细胞）、CD8+T细胞等免疫细胞表面表达的激活性受体，其配体在多种肿瘤细胞表面高表达，包括人类MHC-I类链相关分子（MICA和MICB）和人类UL16结合蛋白（ULBPs）。当NKG2D与这些配体结合后，可激活免疫细胞的杀伤活性，从而发挥抗肿瘤作用。

多项临床前研究和早期临床试验已经展示了人源性NKG2DCAR-T细胞疗法在治疗多种癌症方面的潜力。在一些血液系统恶性肿瘤的研究中，如急性髓细胞白血病（AML），接受NKG2D-CAR-T治疗的复发/难治性患者获得了完全缓解，为这些患者提供了新的治疗选择。在实体瘤治疗领域，虽然面临着诸多挑战，如肿瘤微环境的免疫抑制、CAR-T细胞的浸润和存活等问题，但也有研究表明，NKG2DCAR-T细胞能够在一定程度上识别和杀伤实体瘤细胞，展现出了治疗实体瘤的前景。

然而，如同任何新兴的治疗技术一样，人源性NKG2DCAR-T细胞疗法在临床应用中也面临着安全性方面的诸多挑战。细胞因子释放综合征（CRS）是CAR-T细胞治疗中较为常见且严重的不良反应之一。当CAR-T细胞与肿瘤细胞结合并被激活后，会迅速释放大量的细胞因子，如白细胞介素-6（IL-6）、干扰素-γ（IFN-γ）等，这些细胞因子的过度释放可导致全身炎症反应，出现高热、低血压、呼吸衰竭等症状，严重时甚至会危及患者生命。此外，神经毒性也是不容忽视的问题，患者可能出现意识障碍、癫痫发作、失语等神经系统症状，其发生机制可能与细胞因子的神经毒性作用、血脑屏障的破坏以及CAR-T细胞对神经系统的直接浸润等因素有关。脱靶效应同样可能引发严重后果，由于NKG2D配体不仅在肿瘤细胞表面表达，在一些正常组织细胞上也有低水平表达，CAR-T细胞可能会误识别并攻击这些正常组织，导致器官功能损伤。

非人灵长类动物模型，如猕猴和食蟹猴，在生物医学研究中具有不可替代的重要地位。它们与人类在进化上亲缘关系较近，在解剖学、生理学和免疫学等方面与人类具有高度的相似性。例如，猕猴和人类共享约93%的DNA序列，其免疫系统的组成和功能与人类也极为相似，包括免疫细胞的种类、分布和活化机制等。这使得它们能够更准确地模拟人类对疾病的反应以及对治疗方法的应答，为评估人源性NKG2DCAR-T细胞疗法的安全性提供了更具参考价值的实验数据。

在非人灵长类动物模型中进行人源性NKG2DCAR-T细胞疗法的安全性检测，对于该疗法的临床转化具有至关重要的意义。通过在猕猴或食蟹猴体内观察CAR-T细胞的分布、存活和扩增情况，可以深入了解其在体内的生物学行为，为临床给药方案的制定提供依据。监测动物在治疗过程中是否出现不良反应，如CRS、神经毒性、脱靶效应等相关症状和体征，并通过实验室检查、组织病理学分析等手段评估各器官系统的功能和形态变化，能够全面评估该疗法的安全性风险，及时发现潜在的安全隐患。这不仅有助于优化治疗方案，降低不良反应的发生风险，还能为临床试验的开展提供坚实的理论基础和实践经验，推动人源性NKG2DCAR-T细胞疗法安全、有效地应用于临床，为癌症患者带来更多的生存希望。

1.2NKG2DCAR-T细胞概述

NKG2DCAR-T细胞是通过基因工程技术构建而成，其核心是嵌合抗原受体（CAR），该受体由多个关键部分组成。以常见的NKG2DCAR结构为例，最外侧为NKG2D的胞外结构域，这一结构域犹如“侦察兵”，负责特异性识别靶细胞表面的NKG2D配体。NKG2D配体主要包括人类MHC-I类链相关分子（MICA和MICB）以及人类UL16结合蛋白（ULBPs，也称为人类RAET1）。这些配体在多种肿瘤细胞以及衰老细胞表面呈现高表达状态，而在正常细胞表面则表达量较低或不表达，这为NKG2DCAR-T细胞精准识别异常细胞提供了基础。

连接胞外结构域与细胞内结构域的是铰链区