粗饲料的NDF,ADF的测定 .pdfVIP

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粗饲料的NDF,ADF的测定

试剂及配制:

ADF:酸性洗涤剂2L

40g十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)

溶于2L1NHSO=0.5mol/L

24

1NHSO配制:量取54.34mL98%的浓硫酸(浓度为1.84g/mL),缓慢倒入约

2

500mL水中,搅拌,待冷却后加水定容到2L,即得1NHSO

24

NDF:中性洗涤剂2L

1.称取

37.22g乙二胺四乙酸二钠(EDTA)

13.62g十水硼酸钠

2.同放入1000mL烧杯中,加少量水加热溶解后,再加入

60g十二烷基硫酸钠(SDS)

20mL乙二醇乙醚(triethyleneglycol分子式CHO

6144

3.称取

9.3g无水磷酸氢二钠,置于另一烧杯中,•加少量水,微微加热溶解后倾于

第一个烧杯中,稀释至2000mL。

实验准备

1.提前配制NDF、ADF洗涤溶剂

2.计算样品数,买滤纸袋,滤纸袋数=2×样品数+1

3.将待用试剂一一确认实验室有

4.提前配借2051,2049,2062钥匙

NDF测定步骤2010-9-19

1)用耐溶剂的记号笔给烘干滤袋编号,称重(m)。

1

2)准确称取0.5g(±0.05g)制备好的样品(m)于滤袋中。

3)用封口机封口,然后将样品在滤袋中展平,均匀分布。

4)至少取一个空白滤袋(C),同时做空白测定。

1

5)滤袋放在滤袋架上,然后放入纤维分析仪消煮器中。

洗涤剂加入前,确保放水阀是关闭的

6)加入2000mL中性洗涤剂溶液,100mL/袋,托盘完全浸没。

7)加无水亚硫酸钠20g(0.5g/50mLND溶液)

8)加4.0mLα-淀粉酶

9)盖上盖子并完全密封好,打开搅拌(Agitate)和加热(Heat)开关

10)100°C时开始计时1h,处理时间75min,包括加热升温时间。

11)1h后结束,关上加热和搅拌开关,打开排液阀(开始要慢一点),放掉洗涤

液,慢慢打开加热箱盖,关闭排液阀。

12)加2000mL开水,同时加4.0mLα-淀粉酶,旋紧盖子。

13)搅拌3~5min。关开关排掉废液。重复2次,至洗涤液无泡沫。

14)将滤袋取下来,轻轻挤压去掉多余的水。然后将滤袋放入250mL烧杯中,

加丙酮浸泡5min,取出并轻轻挤压去掉多余的丙酮

15)在通风橱中展开滤袋,让其自然干燥。完全干燥后放入105°C烘箱烘干3h。

警告:在丙酮完全挥发掉之前不能把滤袋放入烘箱中。

16)从烘箱中取出滤袋,放入干燥器中冷却30min,然后称重(m)。

2

计算NDF(%)=(m2-(m1xC1))x100/m

其中:m1为空袋质量g;m为样品质量g;m2为提取处理后样品残渣+滤袋

质量g;C1为空白袋子校正系数(烘干后质量/原来质量)。

ADF测定步骤2010-9-19

1)用耐溶剂的记号笔给滤袋编号,称重(m)。

1

2)准确称取0.5g(±0.05g)制备好的样品(m)于滤袋中。

3)用封口机封口,然后将样品在滤袋中展平,均匀分布。

4)至少取一个空白滤袋(C),同时做空白测定

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