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粗饲料的NDF,ADF的测定
试剂及配制:
ADF:酸性洗涤剂2L
40g十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)
溶于2L1NHSO=0.5mol/L
24
1NHSO配制:量取54.34mL98%的浓硫酸(浓度为1.84g/mL),缓慢倒入约
2
500mL水中,搅拌,待冷却后加水定容到2L,即得1NHSO
24
NDF:中性洗涤剂2L
1.称取
37.22g乙二胺四乙酸二钠(EDTA)
13.62g十水硼酸钠
2.同放入1000mL烧杯中,加少量水加热溶解后,再加入
60g十二烷基硫酸钠(SDS)
20mL乙二醇乙醚(triethyleneglycol分子式CHO
6144
3.称取
9.3g无水磷酸氢二钠,置于另一烧杯中,•加少量水,微微加热溶解后倾于
第一个烧杯中,稀释至2000mL。
实验准备
1.提前配制NDF、ADF洗涤溶剂
2.计算样品数,买滤纸袋,滤纸袋数=2×样品数+1
3.将待用试剂一一确认实验室有
4.提前配借2051,2049,2062钥匙
NDF测定步骤2010-9-19
1)用耐溶剂的记号笔给烘干滤袋编号,称重(m)。
1
2)准确称取0.5g(±0.05g)制备好的样品(m)于滤袋中。
3)用封口机封口,然后将样品在滤袋中展平,均匀分布。
4)至少取一个空白滤袋(C),同时做空白测定。
1
5)滤袋放在滤袋架上,然后放入纤维分析仪消煮器中。
洗涤剂加入前,确保放水阀是关闭的
6)加入2000mL中性洗涤剂溶液,100mL/袋,托盘完全浸没。
7)加无水亚硫酸钠20g(0.5g/50mLND溶液)
8)加4.0mLα-淀粉酶
9)盖上盖子并完全密封好,打开搅拌(Agitate)和加热(Heat)开关
10)100°C时开始计时1h,处理时间75min,包括加热升温时间。
11)1h后结束,关上加热和搅拌开关,打开排液阀(开始要慢一点),放掉洗涤
液,慢慢打开加热箱盖,关闭排液阀。
12)加2000mL开水,同时加4.0mLα-淀粉酶,旋紧盖子。
13)搅拌3~5min。关开关排掉废液。重复2次,至洗涤液无泡沫。
14)将滤袋取下来,轻轻挤压去掉多余的水。然后将滤袋放入250mL烧杯中,
加丙酮浸泡5min,取出并轻轻挤压去掉多余的丙酮
15)在通风橱中展开滤袋,让其自然干燥。完全干燥后放入105°C烘箱烘干3h。
警告:在丙酮完全挥发掉之前不能把滤袋放入烘箱中。
16)从烘箱中取出滤袋,放入干燥器中冷却30min,然后称重(m)。
2
计算NDF(%)=(m2-(m1xC1))x100/m
其中:m1为空袋质量g;m为样品质量g;m2为提取处理后样品残渣+滤袋
质量g;C1为空白袋子校正系数(烘干后质量/原来质量)。
ADF测定步骤2010-9-19
1)用耐溶剂的记号笔给滤袋编号,称重(m)。
1
2)准确称取0.5g(±0.05g)制备好的样品(m)于滤袋中。
3)用封口机封口,然后将样品在滤袋中展平,均匀分布。
4)至少取一个空白滤袋(C),同时做空白测定
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