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第十章高效液相色谱法叶桦珍福建卫生职业技术学院
教学目标掌握化学键合相色谱法；高效液相色谱法对固定相和流动相的要求与选择方法。熟悉实验条件的选择；高效液相色谱仪的组成。了解高效液相色谱法的特点和分类；高效液相色谱法在药物分析中的应用。
第二节高效液相色谱仪
HPLC流程图
高压输液系统包括贮液瓶、高压泵、脱气装置、过滤器、梯度洗脱装置和压力脉动阻尼器等，最重要的部件是高压泵（一）高压输液系统1.转动凸轮，2.柱塞，3.橡胶垫，4.液缸，5流动相入口，6入口单向阀，7..出口单向阀，8.流动相出口柱塞往复泵结构示意图一、基本结构
是将样品溶液送入色谱柱的装置，要求死体积小，密封性和重复性好（二）进样系统HPLC的进样方式有隔膜注射进样和六通阀进样两种，其中六通阀进样常用
4。实验结束用合适的溶剂冲洗，两端塞紧密封；（三）分离系统色谱柱为直形不锈钢管。色谱柱的使用和保存应注意：5。新色谱柱应先按说明书操作2。样品先要用微孔滤膜过滤；1。流动相pH值在2～8之间；3。更换流动相要保证互溶，防止盐析堵塞流路；
将色谱柱分离出组分的浓度或含量转变成电信号。通用型检测器专属型检测器紫外检测器荧光检测器电化学检测器示差折光检测器蒸发光散射检测器固定波长检测器可变波长检测器光电二极管阵列检测器（四）检测系统
二、?基本操作1.检查仪器状态2.制备流动相与样品3.用流动相平衡4.设定并保存方法参数5.设定并保存样品测定参数6.基线与压力稳定后开始进样分析7.对数据进行分析8.清洗和关机操作
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