DB62T 1307-2005 牛胚胎移植技术操作规程.docxVIP

DB62

甘肃省地方标准

DB62/T1307—2005

牛胚胎移植技术操作规程

Com

2005—4—18发布2005—5—1实施

甘肃省质量技术监督局

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DB62/T1307—2005

前言

本标准由甘肃省农牧厅提出。

本标准起草单位：甘肃省畜牧兽医研究所、甘肃农业大学动物医学院。

本标准起草人：桑国俊、余四九。

DB62/T1307—2005

牛胚胎移植技术操作规程

1范围

本规程适用于甘肃省荷斯坦牛和黄牛胚胎移植的各环节。主要包括供体牛和受体牛的选择和处理、制胚、胚胎鉴定、胚胎移植、移植液和冷冻液的配制。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本规程的引用而成为本规程的条款。

GB/T18407.3-2001农产品安全质量无公害畜禽产地环境要求

GB16548-1996畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程

GB16549-1996畜禽产地检疫规范

GB16567-1996种畜禽调运检疫技术规范

GB18596畜禽场污染物排放标准

NY5027-2001无公害食品畜禽饮用水质

NY/T388畜禽场环境质量标准

NY5125-2002无公害食品肉牛饲养兽药使用准则

NY5126-2002无公害食品肉牛饲养兽医防疫准则

NY5127-2002无公害食品肉牛饲养饲料使用准则

NY/T5128-2002无公害食品肉牛饲养管理准则

NY5044-2001无公害食品牛肉

农业生物基因工程安全管理实施办法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1胚胎移植

胚胎移植技术是指将优秀供体牛的胚胎利用技术措施移植给普通受体牛，以实现优秀种牛的引种和快速扩繁为目的的一项新型生物工程技术。

3.2超数排卵

利用促性腺激素提高供体牛同期滤泡发育数量和卵子数量的技术。

3.3供体

提供成熟卵子和胚胎的优秀繁殖母牛，如荷斯坦牛和其它纯种肉牛。

3.3受体

接受(移植)优秀胚胎的普通繁殖母牛，如低产荷斯坦牛和黄牛。

3.4检胚

对胚胎进行质量清洗、鉴定、分级和保存的过程。

4供体牛的选择和超数排卵

4.1供体牛的选择

供体牛必须具备本品种的典型体征，其祖先、同胞或后代生产性能优秀，荷斯坦牛自身是产奶量、乳脂率和乳蛋白量高的优秀个体。肉牛品种必须是国内外著名的纯种肉牛。供体牛的遗传性能必须稳定、系谱清楚，体格健壮，繁殖机能正常，无遗传和传染性疾病，尤其注意牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻和钩端螺旋体病。经产牛作供体牛时，超排处理要在产后3个月进行，在冲卵前3～4周，肌肉注射VAD50万iu,VE500μg。育成牛在14～18月龄时可作为供体牛实施超数排卵。选择配种的公牛必须是经过后裔测定的优秀个体。

4.2供体牛的饲养管理

供体牛应饲喂优质饲草和饲料，补充高蛋白饲料、维生素和矿物质，并供给

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盐和清洁的饮水，做到合理饲养，科学管理。供体牛在采胚前后应保证良好的饲养条件，不得任意变换草料和管理程序，保持中等以上体膘。

4.3超数排卵

供体牛的超数排卵在自然发情或诱发发情的第9～13d实施。

供体牛发情当天为第Od,在发情后的第9～13d肌注FSH,每隔12h,分4d减量注射，使用总剂量为FSH7.5～10mg(中科院动物所)或300～400mg(加拿大)。在处理的第3d同时肌注氯前列烯醇(ICI)0.8mg(早晚各一次)。超排药品的剂量和比例根据不同厂家和批号须稍作调整。

超排程序和药品剂量参见下表。

超数排卵程序和药品剂量分配表

项目

发情周期(天)

9

10

11

12

13-14

(0d)

20-21

(7d)

上午(7:00)

FSH(mg)

2

(50-65)

1.5

(50-55)

1.0

(45-50)

0.5

(35-50)

LH

AI

冲胚

PG(mg)

0.4

下午

(19:00)

FSH(mg)

2

(50-65)

1.5

(50-55)

1.0

(45-50)

0.5

(35-50)

LH

AI

PG(mg)

0.4

4.4供体牛的人工授精

在超排处理后，供体牛开始发情。根据供体牛的发情程度进行第一次输精，同时提前1～2h肌注LH200IU,。间隔12h后再进行第二次输精，同法使用LH。

5冲胚

第一次输精日为第0天，依次后推至第7天，用非手术法回收胚胎。

5.1冲胚准备

供体牛在冲胚前禁水、禁食10～24h。将供体牛保定后(前高后低),在冲胚前10min在第一尾椎和第二尾椎凹陷处剪毛消毒，注射2%利多卡因2～4ml