生物化学蛋白质的结构和功能.pptVIP

免疫印迹测定（Westernblotting）是一种借助特异性抗体鉴定抗原的有效方法。将含有目标蛋白(抗原)的样品首先用电泳分离后，通过转移电泳转印至硝酸纤维素膜或其它膜的表面，然后将膜表面的蛋白质再用抗原抗体反应进行特异性检测。蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白第31页，共49页，星期日，2025年，2月5日Westernblotting蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白第32页，共49页，星期日，2025年，2月5日免疫亲和层析（Immunoaffinitychromatography）是利用抗原和抗体所具有的专一亲和力而设计的层析技术。抗原和抗体在一定条件下能紧密结合成复合物，而这种结合又是可逆的，改变条件可将抗原抗体解离。当把抗原和抗体的一方(称配体)结合在惰性载体上使其固相化，另一方随流动相流经该载体，双方即结合为一整体。然后设法将它们解离，从而得到与配体有特异结合能力的某一特定的物质。蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白第33页，共49页，星期日，2025年，2月5日蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白第34页，共49页，星期日，2025年，2月5日肌球蛋白与肌动蛋白化学能对蛋白质相互作用的影响——肌球蛋白与肌动蛋白第35页，共49页，星期日，2025年，2月5日第1页，共49页，星期日，2025年，2月5日主要内容蛋白质与配体的可逆结合——肌红蛋白与血红蛋白蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白化学能对蛋白质相互作用的影响——肌球蛋白与肌动蛋白第2页，共49页，星期日，2025年，2月5日肌红蛋白与血红蛋白为什么Mb与Hb能结合氧？铁原子只有亚铁态的蛋白质才能结合氧。Mb或Hb蛋白质提供疏水洞穴，固定血红素基，保护血红素铁免遭氧化，为氧提供一个结合部位。结合氧只发生暂时电子重排。第3页，共49页，星期日，2025年，2月5日Mb与Hb结构上的相同与不同之处是什么？α链、β链和Mb的三级结构非常相似只要功能相同（都与氧结合），高级结构就相似，有时甚至是唯一的。Hb与Mb结构上最大不同在于血红蛋白有四级结构，是四聚体，，而肌红蛋白只有三级结构。血红蛋白运载氧能力增强，还能运载H+和CO2，在氧分压变化不大范围内完成载氧和卸氧工作。且Hb为变构蛋白，可受环境中其他分子，如H+，CO2和2，3-二磷酸甘油酸（BPG）的调节。第4页，共49页，星期日，2025年，2月5日协同效应与别构效应氧与血红蛋白结合是协同进行的，具有正协同性同促效应，即一个氧分子与Hb结合，使同一Hb分子中其余空的氧结合部位对氧亲和力增加，再结合第二、三、四个氧分子则比较容易。H+，CO2和BPG与Hb结合部位离血红素基甚远，是通过别构效应调节Hb与氧的结合。pH降低（H+增加），CO2压力增加均降低血红蛋白对氧亲和力，促进血红蛋白释放氧；反之高浓度氧又促使脱氧血红蛋白释放H+和CO2。（Bohr效应）BPG降低Hb对氧亲和力。第5页，共49页，星期日，2025年，2月5日镰刀型贫血病血液中含大量镰刀形红细胞HbS，没有足够可承担输氧的正常圆形细胞HbA。镰刀状细胞贫血病是血红蛋白分子突变引起的。氨基酸测序发现HbA与HbS区别在于β-链上6-位Glu（HbA）变为Val（HbS），结果由于疏水相互作用，β-链上6-Val与1-Val接近，使血红蛋白分子从扁平状压缩变形，形成细长聚集体红细胞，构成镰刀形，与氧结合力降低。第6页，共49页，星期日，2025年，2月5日第7页，共49页，星期日，2025年，2月5日免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白第8页，共49页，星期日，2025年，2月5日1、免疫球蛋白是指具有抗体（antibody）活性，或化学结构与抗体相似的球蛋白。一般情况下，免疫球蛋白指的就是抗体。2、抗体具有两个显著特点：高度的特异性和庞大的多样性。蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白一、基本概念第9页，共49页，星期日，2025年，2月5日3、抗原(antigen,Ag)是一类能诱导免疫系统发生免疫应答，并能与免疫应答的产物(抗体或效应细胞)发生特异性结合的物质。抗原具有免疫原性和反应原性两种性质。4、免疫原性是指抗原刺激机体后，机体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。5、反应原性是指产生的抗体或致敏T淋巴细胞能与抗原进行特异性结合的免疫反应。蛋白质与配体结合的空间互补性——免疫球蛋白第10页，共49页，星期日，2025年，2月5日6、既具免疫原性又具反应原性的抗原称免疫原。某种物质之所以