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融合蛋白PML-RARα对NRF2信号通路的调控机制及肿瘤关联研究

一、引言

1.1研究背景

在机体的防御体系中，NRF2-KEAP1信号通路占据着举足轻重的地位，它是细胞抵御氧化应激和外源性有害物质侵袭的关键防线。正常生理状态下，KEAP1作为NRF2的负调控蛋白，与NRF2紧密结合，使NRF2维持在低水平表达状态。KEAP1蛋白具有多个结构域，其中BTB结构域可与Cul3形成泛素E3连接酶复合体，而DGR结构域能特异性识别并结合NRF2的Neh2结构域，通过这种双重作用，将NRF2锚定在细胞质中，并促使其泛素化降解，从而严格控制NRF2的活性。

当细胞遭遇氧化应激，如受到活性氧（ROS）、亲电试剂等刺激时，KEAP1分子中的关键半胱氨酸残基会发生修饰。这些修饰改变了KEAP1的构象，削弱了其与NRF2的相互作用，使得NRF2得以从KEAP1的束缚中解脱出来。游离的NRF2迅速发生核转位，进入细胞核后与小Maf蛋白形成异二聚体，进而识别并结合到抗氧化反应元件（ARE）上，启动一系列抗氧化基因和解毒酶基因的转录表达。这些基因产物包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）等，它们协同作用，增强细胞的抗氧化能力，促进有害物质的代谢和排出，有效维持细胞内环境的稳定。

然而，在肿瘤发生发展过程中，NRF2-KEAP1信号通路常常出现异常激活的现象。一方面，KEAP1基因的突变或缺失会导致其对NRF2的抑制功能丧失，使得NRF2持续性激活。研究表明，在非小细胞肺癌中，KEAP1基因的突变频率较高，突变后的KEAP1无法正常结合和降解NRF2，导致NRF2在细胞核内大量积累，促进肿瘤细胞的增殖、存活和转移。另一方面，NRF2基因自身的扩增或激活突变也能使其活性异常增强。在结直肠癌中，部分患者存在NRF2基因的扩增，导致NRF2蛋白高表达，进而上调其下游抗凋亡基因和代谢相关基因的表达，赋予肿瘤细胞更强的生存优势，同时增强了肿瘤细胞对化疗药物的耐受性，使得治疗效果大打折扣。

异常激活的NRF2不仅促进肿瘤细胞的生长和存活，还对肿瘤微环境产生深远影响。它可以调节肿瘤细胞与周围基质细胞之间的相互作用，促进血管生成和免疫逃逸。通过上调血管内皮生长因子（VEGF）等血管生成因子的表达，NRF2为肿瘤的生长提供充足的养分和氧气供应；同时，通过抑制免疫细胞的活性和功能，如抑制T细胞的增殖和细胞毒性，NRF2帮助肿瘤细胞逃避机体免疫系统的监视和攻击，进一步推动肿瘤的恶性进展。

目前，针对NRF2-KEAP1信号通路的研究主要集中在小分子调节剂的开发上。这些小分子调节剂旨在通过靶向KEAP1-NRF2相互作用或调节NRF2的转录活性，来恢复信号通路的正常功能。然而，这些调节剂的临床应用仍面临诸多挑战，如药物的特异性和有效性有待提高，部分调节剂可能会引发不良反应，且长期使用可能导致肿瘤细胞产生耐药性。因此，深入探索NRF2-KEAP1信号通路的调控机制，寻找新的干预靶点，对于开发更有效的肿瘤治疗策略具有迫切的现实需求。

核受体作为一类重要的转录因子，在细胞的生长、分化、代谢等生理过程中发挥着关键调控作用。越来越多的研究表明，核受体可以通过多种方式参与NRF2信号通路的调节，二者之间存在着复杂而精细的交互作用。一些核受体能够与NRF2相互结合，协同调节下游基因的表达；另一些核受体则可以通过调节KEAP1的表达或活性，间接影响NRF2的稳定性和功能。这种交互作用为我们深入理解NRF2信号通路的调控网络提供了新的视角，也为开发基于核受体的肿瘤治疗策略提供了潜在的理论依据。

急性早幼粒细胞白血病（APL）是一种特殊类型的急性髓系白血病，其发病机制与t(15;17)染色体易位密切相关。该易位导致15号染色体上的早幼粒细胞白血病（PML）基因与17号染色体上的维甲酸受体α（RARα）基因发生融合，形成PML-RARα融合基因，进而编码产生PML-RARα融合蛋白。PML-RARα融合蛋白具有不同于正常PML和RARα蛋白的功能，它通过与核受体辅阻遏物（NCoRs）等形成异常复合物，招募组蛋白脱乙酰化酶（HDAC）等表观修饰酶，抑制细胞分化相关基因的表达，从而阻碍早幼粒细胞的正常分化，导致白血病的发生。

在APL的发生发展过程中，NRF2-KEAP1信号通路是否受到PML-RARα融合蛋白的影响，以及这种影响背后的分子机制，目前尚不完全清楚。研究PML-RARα融合蛋白对NRF2信号通路的调控作用及具体机理，不