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在图距10以内曲线近似直线,重组率几乎等于交换率,可直接看作是图距。当图距大于10时,重组率总是小于交换率,不能直接被看作为图距,必须加双交换的值予以校正。重组率最大值不可能超过50%。Haldane图谱函数,示交换值和真实图距的关系相应的图距单位(100x,x是交换率)观察到的重组值RF(%)第31页,共54页,星期日,2025年,2月5日6.4基因定位与染色体作图6.4.1基因直线排列原理及相关概念基因定位(genemapping):根据重组值确定不同基因在染色体上的相对位置和排列顺序的过程。染色体图(chromosomemap):又称基因连锁图(linkagemap)或遗传图(geneticmap)。依据基因之间的交换值(或重组值),确定连锁基因在染色体上的相对位置而绘制的一种简单线性示意图。图距(mapdistance):1%重组值(交换值)去掉其百分率的数值定义为一个图距单位(mapunit,mu),后人为了纪念现代遗传学的奠基人Morgan,将图距单位称为厘摩(centimorgan,cM),1cM=1%重组值去掉%的数值。第32页,共54页,星期日,2025年,2月5日任何3个距离较近的a,b,c连锁基因,若已分别测得a,b和b,c间的距离,那么a,c间的距离,就必然等于前二者距离的和或差。这就是摩尔根学生A.H.Sturtevant第一次提出的基因的直线排列原理。AlfredH.Sturtevant1891-1970第33页,共54页,星期日,2025年,2月5日在果蝇X染色体上,除白眼(w)、黄体(y)基因外,还有隐性的粗脉翅(bi)基因,经测交得知bi—w的交换值为5.3%(5.3cM),w—y的距离为1.1cM,那么bi—y的距离究竟是多少?从理论上推测,这取决于w、y、bi这三个基因在X染色体上的排列顺序,它们不外乎下列两种方式:(1)w—y—bi或(2)y—w—bi。决定哪一种是合理的排列就必须测定bi—y的交换值。测交的结果为5.5%(5.5cM)。这样经过3次两点测交(two-pointtestcross),就可把第(2)种排列关系确定下来。第34页,共54页,星期日,2025年,2月5日两点测验:通过三次亲本间两两杂交,杂种F1与双隐性亲本测交,考察测交子代的类型与比例。例:玉米第9染色体上三对基因间连锁分析:子粒颜色: 有色(C)对无色(c)为显性;饱满程度: 饱满(SH)对凹陷(sh)为显性;淀粉粒: 非糯性(Wx)对糯性(wx)为显性.(1).(CCShSh×ccshsh)F1 × ccshsh(2).(wxwxShSh×WxWxshsh)F1× wxwxshsh(3).(wxwxCC×WxWxcc)F1 × wxwxcc第35页,共54页,星期日,2025年,2月5日两点测验的3个测交结果第36页,共54页,星期日,2025年,2月5日两点测验:步骤(2/3)2.计算三对基因两两间的交换值
估计基因间的遗传距离。第37页,共54页,星期日,2025年,2月5日两点测验:步骤(3/3)3.根据基因间的遗传距离确定基因间的排列次序并作连锁遗传图谱。C-Sh:3.6 Wx-Sh:20 Wx-C:22 第38页,共54页,星期日,2025年,2月5日两点测验:局限性1.工作量大,需要作三次杂交,三次测交;2.不能排除双交换的影响,准确性不够高。当两基因位点间超过五个遗传单位时,两点测验的准确性就不够高。第39页,共54页,星期日,2025年,2月5日6.4.2三点测交(three-pointtestcross)与染色体作图为了进行基因定位,摩尔根和他的学生Sturtevant改进了上述两点测交,创造了三点测交方法,即将3个基因包括在同一次交配中。进行这种测交,一次实验就等于3次两点试验。已知在果蝇中棘眼(ec)、截翅(ct)和横脉缺失(cv)这3个隐性突变基因都是X连锁的。把棘眼、截翅个体与横脉缺失个体交配,得到3个基因的杂合体ecct+/++cv(ec、ct、cv的排列不代表它们在X染色体的真实顺序),取其中3杂合体雌蝇再与3隐性体ecctcv/Y雄蝇测交,测交后代如下表。第40页,共54页,星期日,2025年,2月5日序号表型实得数1ecct+2125亲本型2++cv22073ec+cv273单交换I型4+ct+2655ec++217单交换II型6+ctcv2237+++5双交换型8ecctcv3合计53
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