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适配体信号放大技术赋能沙门氏菌快速检测：原理、创新与应用

一、引言

1.1研究背景与意义

沙门氏菌（Salmonella）作为革兰氏阴性菌，在自然界分布广泛，是一类极具代表性的人畜共患病原菌，对公共卫生安全构成严重威胁。据世界卫生组织（WHO）统计，全球每年约有9380万人感染沙门氏菌，其中约15.5万人因感染死亡，且实际感染人数可能远超统计数据。这是因为部分轻度感染病例未就医，或诊断检测方法有限，导致许多病例未被准确统计和报告。

沙门氏菌感染人类后，主要引发胃肠道症状，如发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻等。幼儿、老年人以及免疫力低下人群感染后，沙门氏菌可能进入血液，引发菌血症，严重时危及生命，少数患者还可能并发脑膜炎或骨髓炎。2018年美国爆发的沙门氏菌疫情，涉及23个州，超过200人感染，多人住院治疗，原因是食用了被污染的西红柿；2021年欧洲因鸡蛋污染引发的沙门氏菌感染事件，导致大量鸡蛋被召回，给食品行业带来巨大经济损失，也引发民众对食品安全的担忧。

在食品行业，沙门氏菌是导致食品安全问题的主要病原菌之一。动物性食品，如肉、蛋、奶制品等，常因动物感染沙门氏菌或加工处理过程中卫生条件差、交叉污染等原因受到污染。一旦被污染的食品进入市场，消费者食用后极易感染沙门氏菌。除动物性食品外，新鲜农产品如蔬菜、水果也可能因生长环境受污染或加工、运输、销售环节卫生把控不严而携带沙门氏菌，扩大了沙门氏菌的传播范围，增加了食品安全风险。在食品加工和销售过程中，沙门氏菌可通过受污染的设备、器具、人员接触等途径传播，如食品加工车间的刀具、案板等工具若未彻底清洗消毒，会成为沙门氏菌传播媒介，造成食品交叉污染。

此外，沙门氏菌还可通过水源传播，污染的水源会导致大量人群感染，引发公共卫生事件。如1994年美国因牛奶污染引发的沙门氏菌感染事件，涉及22个州，约22万人感染，原因是奶牛场水源被沙门氏菌污染，牛奶在加工过程中未彻底杀菌，导致大量消费者感染。在发展中国家，由于卫生基础设施薄弱，水源污染问题更为严重，增加了沙门氏菌传播风险。

快速、准确检测沙门氏菌对保障食品安全和公共卫生至关重要。传统检测方法如国标法（GB4789.4-2016），需经过前增菌、选择性增菌、分离培养、生化鉴定和血清分型等步骤，检测周期长，至少需4-7天才能得出明确诊断结果。这在应对食品生产、流通环节的快速检测需求和疫情防控时存在明显不足，无法及时采取有效防控措施，易导致疫情扩散和食品安全事件发生。免疫学方法如酶联免疫吸附测定法（ELISA）虽灵敏度较高，但多价抗血清存在交叉反应，易产生假阳性结果；分子生物学方法如聚合酶链式反应（PCR），操作复杂，对实验条件和设备要求高，检测成本也较高，且存在假阴性或假阳性问题。这些传统检测方法在实际应用中各有局限性，难以满足快速、准确、灵敏、简便且低成本的检测需求。

适配体信号放大技术作为新型检测技术，在沙门氏菌快速检测领域展现出独特优势。适配体是通过指数富集的配体系统进化技术（SELEX）筛选出的单链寡核苷酸，能与相应配体高亲和力、强特异性结合，具有稳定性高、易于合成修饰、成本低等优点。适配体不受pH、温度等环境因素影响，在复杂生物样品中能稳定与目标分子结合；可通过固相合成法快速高效合成，还能引入荧光基团、生物素等标记物，改善其性能，满足不同检测需求。适配体信号放大技术利用适配体与目标分子特异性结合，通过各种信号放大机制将检测信号放大，显著提高检测灵敏度和准确性。如催化发夹组装（CHA）技术，通过形成更多碱基对产生自由能变化，实现信号按幂函数级别扩增，操作简单，无需仪器，有效解决传统检测方法灵敏度低、准确性差等问题，为沙门氏菌快速检测提供新途径和方法，对保障食品安全和公共卫生意义重大。

1.2沙门氏菌概述

沙门氏菌隶属于肠杆菌科沙门氏菌属，是一类革兰氏阴性菌，具有鞭毛，能运动，无芽孢，兼性厌氧。其菌体呈杆状，大小约为（0.7-1.5）μm×（2-5）μm，在普通培养基上易于生长，形成圆形、光滑、湿润、边缘整齐的菌落。

沙门氏菌血清型繁多，目前已发现超过2600种血清型，不同血清型在致病性、宿主范围和流行病学特征上存在差异。如鼠伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphimurium）和肠炎沙门氏菌（Salmonellaenteritidis）是常见的引起人类食物中毒的血清型，可通过污染的食物和水源传播，引发急性胃肠炎症状；伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphi）则是导致伤寒的病原菌，主要通过粪-口途径传播，感染后可引起持续发热、相对缓脉、全身中毒症状等，严重时可危及生命。

沙门氏菌对人类健康危害严重，感染后主要引起胃肠道疾病，如恶心、呕吐、腹痛、腹泻