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项目作业指导书ItemsStandardoperatingprocedures

微生物厌氧菌检测操作规程

Operatingproceduresfordetectionofanaerobicmicroorganism

文件编号Documentnumber：XX-XX-XX-XX-XX-001

版本号Version：E/0

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微生物厌氧菌检测操作规程

Operatingproceduresfordetectionofanaerobicmicroorganism

1目的Objective

厌氧菌作为体内正常菌群的主要组成成份，主要分布在口腔、肠道、上呼吸道和女性生殖道等部位，常引起内源性感染。厌氧菌感染可累及机体各个部位、组织及器官，其中一部分为单纯厌氧菌感染，但大部分是与需氧菌或兼性厌氧菌混合感染，进行厌氧菌的检测对感染的诊断与治疗有重要意义。

2原理和方法TestPrinciple

原理：专性厌氧菌即通常所说的厌氧菌，是一类在正常的空气环境中不生长，需低氧分压条件才生长的细菌。这类细菌缺乏完整的代谢酶系统，以无氧发酵的方式进行能量代谢，不能利用氧并能被其抑制。不同的厌氧菌对氧的敏感度各不相同，收集样本、细菌培养鉴定过程中必须最小限度地暴露于有氧环境中。

方法：培养法。

3检验申请Inspectionapplication：

按常规申请单要求处理。

4标本采集和处理SpecimenCollectionandStorage

4.1患者准备

见《微生物标本的采集、保存及运输操作规范》。

4.2标本的采集、保存和运输

4.2.1厌氧标本采集指征

4.2.1.1厌氧菌感染有细菌感染的一般症状：如发热（临床上最常见的无芽孢厌氧菌感染，通常为低热），感染局部红、肿、热、痛，血象升高（白细胞总数和中性粒细胞数升高）。

4.2.1.2大多数厌氧菌都能在感染局部产生气体，其中以产气荚膜梭菌感染产生的气体最显著，可在感染局部引起严重的组织肿胀和坏死，称气性坏疽。部分厌氧菌并不产生气体，故局部无气体产生并不能排除厌氧菌感染。

4.2.1.3分泌物有恶臭、带血、或呈黑色、或黄色硫磺样颗粒，厌氧菌生长与代谢过程中可产生多种具有腐败性臭味的物质，故厌氧菌感染产生的分泌物往往有恶臭。分泌物带血或呈黑色，在紫外线照射下发出红色荧光，是产黑素普雷沃菌感染特征。分泌物含有硫磺颗粒，可能是放线菌感染。

4.2.1.4人体上呼吸道、消化道和泌尿生殖道的黏膜表面寄生大量的厌氧菌，这些部位的炎症常常为厌氧菌感染所致。

4.2.1.5长期大量应用抗生素，尤其是氨基糖苷类抗生素，如链霉素、庆大霉素、卡那霉素和新霉素等，抑制了体内正常菌群中的兼性厌氧菌生长，而大多数厌氧菌对这些抗生素耐药。

4.2.1.6细菌常规培养阴性（在厌氧菌和兼性厌氧菌混合感染时可培养出兼性厌氧菌），但直接涂片镜检可查见细菌，且细菌染色不均、形态各异、具有明显的多形性。

4.2.1.7具备细菌感染的一般症状（如发热、血象升高等），同时具有一项厌氧菌感染的特征性表现者，应考虑有厌氧菌感染、厌氧菌与需氧菌或兼性厌养菌混合感染的可能。

4.2.2厌氧标本采集原则

4.2.2.1避免在有厌氧菌寄生的部位，如上呼吸道、消化道、女性生殖道和下尿道等外界相通的腔道内采集标本。应从无正常菌群寄生的部位，如环甲膜以下的气管、支气管和肺部组织、胸腹腔或深部脓肿等部位采集厌氧菌标本。

4.2.2.2经皮肤黏膜组织采集标本时，需严格消毒，以防止皮肤黏膜表面正常菌群的污染。

4.2.2.3厌氧菌标本的采集多采用无菌针筒穿刺法，抽取深部脓液或体液。

4.2.2.4避免接触空气。

4.2.3各部位厌氧菌标本的采集

4.2.3.1血液、骨髓：怀疑菌血症、败血症或骨髓厌氧菌感染时可抽取血液做厌氧菌培养。一般应在发热初期（最晚在发热高峰期）以及抗菌药物用药前采血。

4.2.3.2中枢神经系统：厌氧菌很少引起脑膜炎，因此不需要对脑脊液进行常规厌氧培养，当怀疑中枢神经系统厌氧菌感染时，可采集脑脊液进行厌氧培养。

4.2.3.3呼吸系统：怀疑支气管和肺部厌氧菌感染时，应从环甲膜以下抽取肺部分泌物，或直接肺穿刺抽取分泌物，也可用带有保护取样刷不被口咽部正常菌群污染的套管，通过纤维支气管镜从肺部抽取痰液或分泌物。

4.2.3.4泌尿系统：怀疑肾脏、输尿管或膀胱厌氧菌感染时，应从耻骨联合上方经皮肤穿刺膀胱抽取尿液做厌氧菌检