DB15T 4152-2025 玉米秸秆低温高效降解菌剂制备技术规程.docxVIP

ICS65.020.99CCS

ICS

65.020.99

CCS

B04

内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准

DB15/T4152—2025

玉米秸秆低温高效降解菌剂制备技术规程

Technicalcodeofpracticeonpreparationoflowtemperatureandhighefficiencydegradationagentforcornstalk

2025-08-15发布 2025-09-15实施

内蒙古自治区市场监督管理局 发布

DB15/T4152—2025

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。

本文件由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC20）归口。本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业科学院。

本文件主要起草人：高聚林、于晓芳、张赛楠、青格尔、马达灵、屈佳伟、韩升才、胡树平、王志刚、孙继颖、王富贵、包海柱、苏治军、王振、谢岷、李懿璞、刘剑。

I

DB15/T4152—2025

玉米秸秆低温高效降解菌剂制备技术规程

范围

本文件规定了玉米秸秆低温高效降解菌剂制备的菌种选择、菌液发酵、菌剂制备、质量要求等技术要求。

本文件适用于玉米秸秆低温（4℃～15℃）降解菌剂的制备。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB20287 农用微生物菌剂

DB15/T2770 玉米秸秆低温高效降解菌筛选技术规程

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

CFU（菌落形成单位）colony-formingunits

在规定的培养条件下，测定细菌悬液、染菌载体等样本中含有的活菌数量。通过计算长成的单个菌落数，而得到单位体积菌悬液中或染菌载体上的存活试验菌菌数（CFU，colony-formingunits）。

OD值（吸光值）opticaldensity

光通过被检测物，前后的能量差异即是被检测物吸收的能量，特定波长下，同一被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。被检测物吸收的光密度，是检测方法里的专有名词，检测单位用OD值表示，1OD=log10（1/trans），其中trans为检测物的透光率T值。

菌种选择

菌种组成

菌种由6株细菌组成，分别为蜡样芽孢杆菌（Bacilluscereus）、枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）、假单孢菌（Pseudomonassp.strainSeaQual）、粪产碱杆菌（Alcaligenesfaecalis）、恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）和洛菲不动杆菌（Acinetobacterlwoffii）。

菌种指标

1

DB15/T4152—2025

菌种满足表1，按照DB15/T2770执行。

表1 秸秆降解能力指标

项目

数值范围

纤维素酶活性（U/mL）

≥1.5

木聚糖酶活性（U/mL）

≥2

木质素过氧化物酶活性（U/L）

≥50

锰过氧化物酶活性（U/L）

≥200

漆酶活性（U/L）

≥150

秸秆失重率（14天）

≥30%

菌龄

选择处于对数生长期且活菌数最多时期的菌液作为种子液进行扩繁发酵。单菌OD值≥1.0，单菌活菌数≥1.0×107CFU/mL，活菌数和OD值的测定方法按照GB20287执行。

菌液发酵

仪器设备

高压蒸汽灭菌锅、紫外分光光度计、发酵罐（带pH电极和溶氧电极）、高速冷冻台式离心机、恒温培养箱、恒温振荡培养箱等。

培养基

胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、蒸馏水1L，初始pH值为自然值（6.65±0.15）。

培养基在使用前于高温灭菌锅中121℃灭菌20min。

时间

将菌株等体积混合后接种于发酵培养基中，28℃条件下发酵28h～32h，菌液OD值、活菌数、溶氧量、pH值等指标达到表2要求。

表2 菌液发酵及菌剂制备指标

项目

数值范围

混合菌液OD值

≥1.5

混合菌液活菌数

≥1×1010CFU/mL

混合菌液溶氧量

≤20%

混合菌液pH值

7～8

菌剂制备

配方

2

DB15/T4152—2025

以玉米秸秆外皮粉为吸附剂，以淀粉和麸皮为保护剂，吸附剂与保护剂的比例为1:3，两种保护剂间的比例为1:3，即玉米秸秆外皮粉：淀粉：麸皮=4:3:9。

冷冻干燥

发酵液在4℃、112