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ICS65.150
B50
备案号:DB12
天津市地方标准
DB12/T361-2008
单极虫病诊断规程
StandardmethodfordiagnosingLohanellidaeinfish
2008-02-19发布2008-03-30实施
天津市质量技术监督局发布
DB12/T361-2008
前言
本标准的编写以GB/T1.1-2000的编制要求为指南。
本标准的附录A、B、C为资料性附录。
本标准由天津市水产局提出。
本标准起草单位:天津市水产研究所
本标准主要起草人:李军、邓威、王玉佩、杨凯、马文婷、王菁。本标准丁2008年××月前次发布。
I
1
DB12/T361-2008
单极虫病诊断规程
1范围
本规程规定了鱼类单极虫病诊断规程的定义、病原种类、材料和试剂、采样、诊断步骤、病原体计数及结果判定的要求。
本规程适用于对淡水食用鱼类及观赏鱼单极虫病的诊断。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用丁本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法
《鱼类寄生虫与寄生虫病》张剑英主编,科学出版社,1999
《鱼病调查手册》中国科学院水生生物研究所鱼病学研究室编著,上海科学技术出版社,1981,第二版
OIE《水生动物疾病诊断手册》2000第三版
3术语和定义
下列术语和定义适用丁本标准。
单极虫病lohanellidae
由单极虫属(ThelohanellusKudo,1933)的一些种类寄生鱼体导致寄主各种临床表现的疾病叫单极虫病。
4病原种类
在鱼类养殖中能引起单极虫病的常见种类有鲮单极虫(T.rohitae)、光滑单极虫(T.hovorkae)、吉
陶单极虫(T.kitauei)等。参照《鱼类寄生虫与寄生虫病》1999年第二篇第六章第二节-十二-单极虫科
-单极虫属及单极虫病,见附录A(资料性附录)。
5材料和试剂
5.1材料
晋通光学显微镜、放大镜、双筒解剖镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术刀、手术剪、吸水纸、培养皿、滴管。
5.2试剂
0.85%生理盐水、70%酒精、4%~5%或10%福尔马林、甘油胶胨、肖氏液。
配置试剂用水符合GB/T6682-1992要求。
6采样及目检
6.1样品目检
单极虫的多数种类,寄生于鱼的体表、鳃、肠道及体腔,都表现出肉眼可见的症状,即白点状或白色的瘤状孢囊,孢囊形状和大小不规则,颜色白、不透明。用镊子取下一个孢囊放在载玻片上,加上一
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学兔兔
DB12/T361-2008
滴生理盐水,用盖玻片盖上轻压,如孢囊破裂并流出乳白色液体,可初步诊断为单极虫。观察结束,做好详细记录并进行实验室检查的采样。
6.2采样量
用于检查诊断的鱼应有一定数量,以保证检查结果具有代表性和可靠性,进行单极虫病检查时采集的样品至少5尾~10尾。也可按照OIE《水生动物疾病诊断手册》2000第三版中第二部分鱼类病害、第1.1章、第二部分概论B.采样方法进行采样,见附录B(资料性附录)。
6.3样品运输
实验室检查要用活鱼进行检查,如果是死鱼,必须是新鲜刚死的——揭开鳃盖观察,如鳃瓣鲜红,表示鱼死术久,可以用来检查。
实验室进行单极虫病检查时应在采集的病料中加注原池水进行活体运输。每个容器只装运同一种病料送至实验室。如果运输时间超过2h,则应要有增氧设备并应尽量保证低温低密度。
7诊断步骤及保存
7.1显微镜镜检
在100倍或400倍显微镜下,压破的孢囊液体呈橄榄形的孢子状,清晰可见,可诊断为单极虫病。一个孢囊中有成千上万个孢子虫。
7.1.1体表
检查体表,用解剖刀刮取鳞片下的瘤状物,置于载玻片上,加一滴生理盐水,盖上盖玻片用拇指轻轻压片,压片后,显微镜观察。
7.1.2鳍
日检正常的鱼,取务个鳍进行检查.取载玻片一张,滴一滴生理盐水,剪下各鳍,置于玻片上,解剖镜检查有否孢囊存在。
日检鱼体务鳍如有溃烂或白点,用镊子刮取溃烂或白点部位,置于载玻片上,加一滴生理盐水,用盖玻片盖上轻压,白点或孢囊破裂,显微镜检查。
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